WAKO 亲和层析法纯化磷酸化蛋白–Phos-tag 琼脂糖

WAKO 亲和层析法纯化磷酸化蛋白–Phos-tag 琼脂糖

Phos-tagTM与琼脂糖(Agarose)结合利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。  Phos-tag™ Agarose可用于磷酸化蛋白通过柱层析富集,分离,纯化。不使用表面活性剂或还原剂,磷酸化蛋白可以在一个类似体内环境下获得。

Phos-tag™ Agarose为分离、浓缩天然磷酸化的蛋白和生物样品(生理条件下)中磷酸化多肽提供一种高效的方法。

特点:

  • 缓冲液不含有还原剂和去污剂
  • 与亲和层析方法类似
  • 可在1小时内纯化磷酸化蛋白
  • Phos-tag™ Agarose捕获结合到Tyr、Thr、Ser、Asp、His等氨基酸、糖类、脂类上的无机磷酸根和大量二价磷酸根
  • 蛋白可在生理条件(PH7.5)下捕获
  • 无需表面活性剂和还原剂

WAKO 亲和层析法纯化磷酸化蛋白–Phos-tag 琼脂糖说明书下载

Phos-tag Agarose AG-501  [Wako Cat. #302-93561 (0.5 mL)]⇒ Protocol(点击进入下载)


Phos-tag Agarose AG-503  [Wako Cat. #308-93563 (3 mL)]⇒ Protocol点击进入下载)

 

Phos-tag™ Agarose亲和层析原理

应用实例
【纯化细胞裂解液中的磷酸化蛋白】

 M:标准蛋白Marker
Lane 1:全蛋白,未经纯化
Lane 2:纯化后的蛋白洗脱液
Lane 3:漂洗流出液
将Phos-tag™ Agarose填充到柱子中,加入细胞裂解液。

SYPRO Ruby染色(左图),Anti-pTyr抗体进行western blot检测(右图)。
结果显示使用Phos-tag™ Agarose可高效纯化磷酸化蛋白。

产品编号 产品名称 规格 原价
308-99401 Phos-tag™ Agarose 0.5ml 2700
308-93563 Phos-tag™ Agarose 3ml 17440
产品描述

1、悬浮液填料;

2、悬浮液在4度中,可保存至少半年;

3、Phos-tagTM与琼脂糖(Agarose)结合利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。

可用于亲和层析法进行磷酸化蛋白纯化。

Phos-tag® Agarose为分离、浓缩天然磷酸化蛋白和生物样品中磷酸化多肽提供一种高效的方法。

提供各种规格产品,以便用于不同样品的检测。

缓冲液不含有还原剂和去污剂。与亲和层析方法类似。

Phos-tag® Agarose捕获结合到Tyr、Thr、Ser、Asp、His等氨基酸,糖类、脂类上的无机磷酸根和大量二价磷酸根。

 

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

英  文  名: Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution

产  地: 日本

商  家: Wako(和光纯药工业株式会社)

wao Phos-tag™实验设计

◆  研究领域

磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究

◆  Phos-tagTM 的简介

Phos-tagTM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tagTM 螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下,该空间恰好能容纳一个磷酸基团,使得螯合有金属离子的Phos-tagTM 分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团,广泛运用于细菌,酵母,昆虫等物种研究。

◆  Phos-tagTM 系列产品

利用螯合有金属离子的Phos-tagTM 可以特异性结合磷酸化基团的特点,研发了Phos-tagTM 系列产品,运用于常见的蛋白实验,比如SDS-PAGE,免疫印迹,亲和层析,质谱等。

Phos-tagTM 系列产品 产品描述 用途 具体运用实验
Phos-tagTM   Acrylamide Phos-tagTM 与丙烯酰胺(Acrylamide,SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子(Zn2+或者Mn2+)和Phos-tagTM Acrylamide。在蛋白电泳过程中,磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合,导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 SDS-PAGE(单一蛋白)

免疫印迹(多种蛋白混合液,例如细胞裂解液,组织均浆液,体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗)

Phos-tagTM Biotin Phos-tagTM 与生物素(Biotin)结合 可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。 免疫印迹(正常SDS-PAGE)
Phos-tagTM  Agarose Phos-tagTM 与琼脂糖(Agarose)结合 利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。 亲和层析法
Phos-tagTM Mass Analytical kit Phos-tagTM 与不同荷质比的Zn结合 检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 质谱实验

备注:除Phos-tagTM Mass Analytical kit之外,其他Phos-tagTM 系列产品都需要配置金属离子溶液。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法!
Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag™ Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。

◆Phos-tag™ 的基本结构

特点
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物

◆原理

◆应用

样品类型: 纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液
样品来源物种: 无物种特异性,可用于人、植物(拟南芥 水稻 棉花等)、动物(斑马鱼 灵长类等)、微生物(酵母 细菌 真菌等) 昆虫(果蝇 蚕等)
分离蛋白大小: 磷酸化蛋白的分离范围在十几到220kDa,文献报道可分离350kDa的磷酸化蛋白
准备的试剂和仪器: 10mM的MnCl2溶液,固体产品需要溶解于甲醇中,其余与常规SDS-PAGE相同
各包装可做实验次数: 2mg包装20μM可制约20块胶,50μM约8块;10mg包装20μM可制100块胶,50μM约40块
凝胶染色: 考马斯亮蓝、银染、荧光染色、阴性染色

相关产品

产品名称 用  途
 Phos-tag™ Acrylamide  分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白
 SuperSep Phos-tag™  分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide
 Phos-tag™ Biotin  检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体
 Phos-tag™ Agarose  纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白
 Phos-tag™ Mass
Analytical Kit
 分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度

 

Phos-tag Acrylamide(丙烯酰胺)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格 Phos-tag在配制胶中的浓度
20μM 50μM 100μM
304-93526 AAL-107S1 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3mL 约10块 约4块 约2块
300-93523 AAL-107M Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 2mg 约20块 约8块 约4块
304-93521 AAL-107 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 10mg 约100块 约40块 约20块

 

SuperSep Phos-tag™ (丙烯酰胺预制胶)

产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块

Phos-tag™ Biotin(生物素)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
301-93531 BTL-104 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg
308-97201 BTL-111S1 Phos-tag Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml

Phos-tag™ Agarose(琼脂糖)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
302-93561 AG-501 Phos-tag™ Agarose 0.5ml
308-93563 AG-503 Phos-tag™ Agarose 3ml

Phos-tag™ Mass Analytical Kit(质谱分析试剂盒)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
305-93551 MS-101KIT Phos-tag™ Mass Analytical Kit 1 set

SuperSep Phos-tag™ 预制胶即开即用!
phos-tag™ 由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™ 是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。

 板大小  100 x 100 x 3 (mm)
 凝胶大小  90 x 85 x 1 (mm)
 孔数  13  17
 孔容积  30 μL  25 μL
 Phos-tag™浓度  50 μmol/L
 丙烯酰胺浓度  10%、12.5%、15% 和17%
 ZnCl2浓度  100 μmol/L

 

优点、特色
·即开即用
·预制胶使用安全
·可长期保存(6个月)
·操作与普通SDS-PAGE一样

◆案例、应用
电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag™)

◆相关产品

产品编号 产品名称 规  格
 058-07681  EasySeparator <配套电泳槽>  1 套
 230-02461  Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa)  500 μL (200 次)
 038-23221  α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1 mg

◆具体实例

1. 体外激酶反应,激酶和底物都带有标签,反应后亲和层析法纯化获得激酶和底物,如何检测底物的磷酸化情况?

如果底物和激酶分子量差别大,通过正常的SDS-PAGE能够区分,建议使用Phos-tagTM Biotin。将激酶和底物进行免疫印迹实验,用Phos-tagTM Biotin作为抗体检测底物的磷酸化基团(需记录底物的条带位置)。可通过剥离(strip)方式剥离Phos-tagTM Biotin,用底物的非磷酸化抗体进一步验证其位置。

如果底物和激酶分子量差别不大,可进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,然后转膜,用底物的非磷酸化抗体检测(没有使用激酶的抗体,所以检测不到激酶的带)。在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE中磷酸化和非磷酸化底物发生分离,用底物的非磷酸化抗体可以检测所有底物。免疫印迹实验后,观察所有的条带,非磷酸化底物由于没有和Mn2+-Phos-tagTM Acrylamide结合,所以迁移速度较快,磷酸化底物则迁移速度变慢。通过迁移率的变化,分析磷酸化底物的含量。

备注:

1) Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中,建议使用α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated(038-

       23221),该产品中含有磷酸化和非磷酸化的α-Casein,确保试剂和实验条件能够分离磷酸化蛋白。

2)如果没有非磷酸化底物,可使用Alkaline Phosphatase(for Biochemistry)(018-10693)对底物进行去磷酸

     化反应。

2. 如何检测EGF(表皮生长因子)刺激后细胞内MAPK的磷酸化水平?

收集EGF刺激的细胞,制备细胞裂解液作为样品。进行正常的SDS-PAGE实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,转膜后用MAPK的非磷酸化抗体作为一抗进行检测(检测所有的MAPK,包括磷酸化和非磷酸化)。正常SDS-PAGE实验中,磷酸化的MAPK和非磷酸化MAPK没有分离,而在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中磷酸化MAPK和非磷酸胡MAPK发生分离,所以转膜后,用MAPK抗体检测,可以看到分离的条带。比较正常的SDS-PAGE用MAPK抗体的免疫印迹实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE用MAOK抗体的免疫印迹实验,多出来的条带就是磷酸化的MAPK。

备注:该实验的前提是EGF刺激后细胞内的MAPK发生磷酸化,细胞内包含磷酸化和非磷酸化的MAPK。如果刺激后细

          胞内不含有磷酸化的MAPK,则无法用Phos-tagTM Acrylamide分离磷酸化和非磷酸化MAPK。

3. 研究蛋白相互作用的实验中,构建带有不同标签的2种融合蛋白,共转染细胞,在细胞内发生磷酸化反应。通过不同标

    签的亲和层析柱获得纯化的蛋白,是否可用Phos-tagTM Agarose纯化,进行后续免疫共沉淀实验(Co-IP)实验?

Phos-tagTM Agarose纯化磷酸化蛋白,采用高盐的洗脱方式,没有使用界面活性剂、还原剂、酸或者碱洗脱,蛋白不发生变性,可进行后续的Co-IP实验。

4. 检测的样品中含有两种磷酸化的蛋白,分子量很接近,如何使用Phos-tagTM 产品检测磷酸化?

如果样品中两种磷酸化蛋白的分子量很接近,通过正常的SDS-PAGE实验无法区分,建议使用Phos-tagTMAcrylamide。进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验后用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测。

也可以使用Phos-tagTM Biotin。进行正常SDS-PAGE实验后,先用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测,剥离(strip)后用Phos-tagTM Biotin。如果磷酸化蛋白量少的 话,剥离(strip)会去除一些蛋白,可能会影响检测的效果。

5. 使用Phos-tagTM Mass Analytical kit,样品中如果含有磷酸缓冲液是否有影响?

该试剂盒检测磷酸化蛋白和多肽的灵敏度较高,样品中含有的磷酸缓冲液会影响磷酸化蛋白与Phos-tagTM 结合。

wako HiPolypeptone (Polypeptone)多聚蛋白胨

wako HiPolypeptone (Polypeptone)多聚蛋白胨

同义名:Hipolypepton;Polypepton;Casein Peptone;多聚蛋白胨;高聚蛋白胨;聚蛋白胨;酪蛋白胨;

HiPolypeptone (Polypeptone) 多聚蛋白胨 日本制药株式会社 392-02115

生厂商:Nihon Pharmaceutical Co. Ltd. 日本制药株式会社(隶属于Takeda Pharmaceutical Group 武田制药株式会社)

基本描述:

HiPolypeptone (Polypeptone) 多聚蛋白胨用作微生物培养用,可配置各种微生物培养基,用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定。以及无菌实验培养基,厌氧菌培养基等细菌生化特性实验用培养基的配置。

产品特点:

制造工艺:对主原料(酪蛋白)经酶分解,经过滤、浓缩、提纯,干燥而得的粉末;

原料来源:新西兰产地(未发生疯牛病)的酪蛋白;

工艺严控:本品由日本四大药业之一的Nihon Pharmaceutical生产,严格按照日本药局方的药品生产规范制备;

质控标准:

外观 Grayish yellow powder
溶解性(5% 水溶液)) Clear Solution
重金属(如Pb)) ≤1ppm
干燥失重 ≤6.0%
炽灼残渣 ≤10%
总氮(T-N) ≥11%
氨基酸氮( A-N) 5~7%

 

订购信息:原装正品,现货供应。欢迎来电咨询上海金畔生物科技有限公司

品牌 货号 名称 规格 价格(元)
日本制药株式会社 392-02115 HiPolypeptone 多聚蛋白胨 500g 咨询

日本进口wako多聚蛋白胨Hipolypepton

品牌: 日本制药
货号: 392-02115,392-02117
保存条件: 室温
供应商: Wako
规格: 500g/20kg
规格: 500g 产品价格: 询价
规格: 20kg 产品价格: 询价

上海金畔生物供应日本制药的多聚蛋白胨系列产品,包括以新西兰产地的酪蛋白为原料的培养基“酪蛋白胨”,和以大豆为原料的“酪蛋白胨S”“酪蛋白胨N”“酪蛋白胨NS”。
品名:多聚蛋白胨
英文名称:Hipolypepton

品牌: 日本和光纯药
货号: 392-02115,392-02117
保存条件: 室温
供应商: Wako
规格: 500g/20kg

 

规格: 500g 产品价格: 询价
规格: 20kg 产品价格: 询价

本系列是将主原料进行酶分解后,提纯、干燥而成的粉末。“Hipolypepton”(酪蛋白胨)的原料酪素钠仅使用未发生过疯牛病的新西兰产区的牛。可配制各种微生物培养基,用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定,以及无菌试验培养基、厌氧菌培养基等细菌生化特性试验用培养基的配置。

胰蛋白胨还广泛应用于高品质的抗生素、维生素、医药工业,氨基酸、有机酸、酶制剂、黄原胶等发酵工业,生化制品及微生物学科研等领域中。临床用于抗炎消肿,工业上用于皮革制造,生丝处理,食品加工。

酪蛋白胨

产品名称 酪蛋白胨
规格 500g 20kg
产品编号 392-02115 398-02117
价格 590 咨询
主原料 酪素钠
动物酶
制造方法 主原料一酶分解一过滤一浓缩一干燥一分装
X产品性质 性状 外观 淡黄白色一淡黄褐色的粉末
气味 气味特别,但无腐臭
溶液澄清度及色泽 淡黄色一黄色澄洁
干燥减量 6%以下
炽灼残渣 10%以下
总氮(T-N) 11%以上
氨基酸氮( A-N) 5-7%

大豆蛋白胨

产品名称 酪蛋白胨S 酪蛋白胨N 酪蛋白胨NS
规格 500g 20kg 300g 10kg 300g 10kg
产品编号 394-02175 390-02177 397-02121 395-021 27 393-02101 301·02107
价格 700 咨询 540 咨询 700 备询
主原料 脱脂大豆 大豆萃取物 脱脂大豆
动植物酶 微生物酶 微生物酶
制造方法 主原料一酶分解—过滤—浓缩—干燥—分装
产品性质 性状 外观 淡黄白色。淡黄褐色的粉末
气味 气味特别,但无腐臭
溶液澄清度丑色泽 淡黄色·黄色澄清 淡黄色·褐色澄清 淡黄色澄清
干燥减量 6%以下 6%以下 9%以下
炽灼残渣 23%以下 15%蹦下 23%以下
总氨( T-N) 7%以上 12%以上 7%以上
氨基酸氮( A-N) 3-5% 5-7% 3-5%

 

产品编号 产品名称 规格
392-02115 酪蛋白胨 500g
398-02117 20kg
394-02175 酷蛋白胨S 500g
390-02177 20kg
397-02121 酪蛋白胨N 300g
395-02127 10kg
393-02101 酪蛋白胨NS 300g
391-0210/ 10kg

 

产品编号 产品名称 规格
394-02131 酵母浸出粉SH 250g
392-02137 10kg
398-02151 酵母浸出粉D-3H 250g
396-02157 10kg
393-02167 酵母浸出粉FH 10kg
393-02145 酪蛋白氨基酸“DAIGO’ 500g
399-02147 10kg

 

wako NK细胞抑制剂

 

Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)

本产品只能用于研究,不能用于人的治疗。

◆原理介绍

Anti Asialo GM1(Rabbit)抗血清可以减少大鼠或者小鼠来源的自然杀伤细胞(NK细胞)的活性,NK细胞是免疫监视细胞。该抗体可以与NK细胞发生特异性结合,从而抑制NK细胞非特异性杀伤靶细胞的活性。靶细胞包括肿瘤细胞、同种异体移植的器官、组织等。可运用于药物筛选,器官移植,自身免疫疾病等研究。

每个产品有具体的体内外的滴定数据。

◆注射方法

小鼠-静脉注射:10-50μL(推荐20μL)具体剂量由滴度和规格而定。第一次注射在4天内有效,因此两周内需要注射3-4次。

大鼠-静脉注射:50-250μL(小鼠剂量的4或5倍)具体剂量还须考虑大鼠的健康状况、体重和NK活性。

小鼠和大鼠-腹腔给药:同等剂量或多于静脉注射。

◆产品信息

 

制备:

 

从牛脑组织里提纯的Asialo GM1与甲基化牛血清白蛋白和弗氏完全佐剂一起使用,可进行反复免疫。用含有磷酸缓冲盐水(ph7.2)的50%硫酸铵透析后,得到血清里的丙种球蛋白(Gammaglobulin)片段。
内容: 含有唾液酸抗体GM1的兔血清50%硫酸铵盐析分层物(含蛋白量约10mg/mL)。
提纯法: 50%的硫酸铵盐析后 ,用含有磷酸缓冲液的生理盐水透析,然后冻干。
特异性: 作用于小鼠和大鼠的自然杀伤细胞;小鼠单核细胞(是一种不含自然杀伤细胞、骨髓、胎儿肝细胞和裸鼠脾脏巨噬细胞的肝细胞);小鼠胎儿胸腺细胞(12日龄;生存率不断降低直到没有出现新生小鼠)(备注:如果浓度高,也能作用于成熟的T淋巴细胞)
免疫球蛋白类型: IgG、IgA和IgM
重组: 建议用蒸馏水(1mL)。由于该产品是使用盐来进行冻干的,如果用其它溶剂如PBS或MEM,就能增加其盐浓度。
抗体滴度: 通过免疫凝聚实验得出结果,抗体滴度比例约1 : 1,000
保存方法: 存储在2~10℃下
包装规格: 1mL样瓶
形状: 干冻品

◆应用案例

适用的动物模型 运用
肿瘤动物模型 与抗肿瘤药物混合后注入肿瘤动物模型内,研究抗肿瘤药物的作用机理。
肝纤维化动物模型 与治疗肝纤维化的药物混合后注入动物模型体内,研究抗肝纤维化药物的作用机理。
器官移植动物模型 器官移植后,会产生免疫排斥反应,机体内的免疫监视会清除”异己“的细胞和器官。可用于研究器官移植后使用的免疫抑制剂的作用机理
自身免疫疾病动物模型 研究治疗自身免疫疾病药物的作用机理。
干细胞动物模型 抑制NK细胞的活性,从而有利于干细胞动物模型的建立。
糖尿病动物模型 研究炎症与糖尿病的关系。

NK细胞抑制剂——Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)(兔源)

Anti Asialo GM1的抗血清可以与NK细胞(自然杀伤细胞)结合,抑制NK细胞非杀特异性杀伤靶细胞的活性。靶细胞包括肿瘤细胞,同种异体移植的器官、组织等。可用于药物筛选、器官移植、自身免疫疾病研究等。NK细胞属于天然免疫细胞,具有免疫监视功能。

特异性:与小鼠、大鼠的NK细胞,小鼠单核细胞(不含有NK细胞的肝脏细胞;骨髓;胎儿肝脏细胞;裸鼠巨噬细胞的脾细胞),胎儿T淋巴细胞(12天)

研究糖尿病的免疫治疗:

据报道,抗细胞凋亡细胞因子IL-15具有促进NK细胞和T细胞(包括调节性T细胞,Tregs)存活和激活上述两种细胞活性的功能。在患有糖尿病的NOD小鼠体内反复注射IL-15。如果每天一次,注射2周,既不抑制也不加速未处理NOD小鼠患糖尿病的情况。但是NK细胞活性丧失的NOD小鼠注射IL-15可以明显减少糖尿病的发病率和延迟糖尿病发病时间,但是NK细胞活性丧失不注射IL-15的小鼠依然病发糖尿病。在用IL-15处理,NK细胞活性丧失的NOD小鼠体内产生的保护效应与CD4+CD25+ Tregs免疫抑制活性增加有关。在该项实验中,用Anti AsGM1注射小鼠,抑制NK细胞活性,导致NOD小鼠NK细胞活性缺失。

摘自:Jinxing Xia et al., Clinica l Immunology.(2010) 134, 130–139

研究败血症中NK细胞的功能

NK细胞和NKT细胞都属于天然免疫系统,但在细菌引起的败血症中这两种细胞的作用是有争议。用Anti Asialo GM1处理小鼠,成为NK细胞活性抑制的小鼠;用CD1d单抗处理小鼠,成为NKT细胞活性抑制的小鼠;同时用同型对照单抗处理小鼠,作为阴性对照。之后这些小鼠感染肺炎链球菌。分析血清和组织样品中细菌的含量,细胞因子,脾细胞凋亡率、用流式鉴定细胞,同时也分析脾细胞miRNA的表达。结果发现NK细胞活性抑制的小鼠延长了存活率。一旦NKT细胞激活抑制,与其他细胞群相比,脾脏的NK (CD3−/NK1.1+)细胞数目增加。NKT细胞活性抑制导致小鼠体内的细菌含量升高,导致血清和脾细胞IFN-γ水平升高。抗CD1d处理小鼠的脾细胞miRNA分析显示miR-200C和miR-29a下调,miR-125a-5p上调。这些变化发生在NK细胞活性抑制后。NK细胞可能与肺炎球菌肺炎的死亡率有关。抑制NKT细胞的激活导致(CD3−/NK1.1+)细胞数目增加,IFN-γ水平升高,改变脾细胞miRNA表达。

摘自Eirini Christaki et al., Journal of Immunology Research, Volume 2015 (2015), Article ID 532717, 10 pages

研究肿瘤的免疫治疗

肿瘤的发展过程包括血管新生,肿瘤尺寸增大和肿瘤转移。使用CXCL14/BRAK (CXCL14) 转基因小鼠研究过度表达的CXC趋化因子配体14 (CXCL14) 在上述生物学现象中的作用。与野生型小鼠相比,转基因小鼠经AOM/DSS诱导的结肠血管新生的发病率显著低很多。肿瘤细胞注射到这些小鼠后,肿瘤尺寸发生变化。与野生型的相比,转基因小鼠肺中转移小瘤的数目明显少,

肿瘤的尺寸也明显变小。在注射肿瘤前后注射Anti Asialo GM1减少了CXCL14在肿瘤生长方面和肿瘤转移的抑制效应,表明激活的NK细胞在CXCL14介导的抑制肿瘤生长和转移期间起重要作用。CXCL14也表达在B16黑色素瘤细胞内表明NK细胞在肿瘤转移方面的重要性。而且转基因小鼠在注射肿瘤细胞后的存活率显著增长。这些转基因小鼠没有明显的不正常,预计肿瘤抑制/预防方面CXCL14起着重要作用。

摘自:Hata R et al.,Scientific Reports(2015) 5 : 9083 | DOI: 10.1038/srep09083

 

动物模型 运用
肿瘤动物模型 与抗肿瘤药物混合后注入肿瘤动物模型体内,研究抗肿瘤药物是否通过激活NK细胞活性达到杀伤肿瘤细胞的作用。
肝病动物模型 与治疗肝病的药物混合后注入动物模型体内,研究药物是否通过激活NK细胞活性达到治疗肝病的效果。
器官移植动物模型 器官移植后会发生免疫排斥反应,机体内的免疫监视系统会清除:异己“的细胞和器官。可用于研究器官移植后免疫抑制剂的作用机理。
自身免疫疾病动物模型 研究治疗自身免疫疾病药物的作用机理。
干细胞动物模型 移植NK细胞活性,有利于干细胞动物模型的建立。

产品列表

产品编号 产品名称 等级 规格
014-09801(986-10001) Anti asialo GM1 (Rabbit)          NK细胞抑制剂 for Immunochemistry 1mL

230-01861 50ml 物体表面湿润张力测试液体No.34.0

230-01861 50ml 物体表面湿润张力测试液体No.34.0

表面湿润张力试验用混合液(Wetting Tension Test Mixture)  ぬれ張力試験用混合液 ( ぬれ張力試験用)

表面湿润张力试验用混合液,用于“塑料薄膜及薄板表面湿润张力试验法”的试剂。

试验方法

用含有试剂的棉棒在试验材料(薄膜)上横向涂抹一次,必需注意涂上的混合液的量会极大影响试验的正确度。涂上试剂后2秒,判定液膜中央部分的状态。当液膜没有产生破裂时,判定为“可润湿”;产生破裂时,判定为“不可润湿”。

ぬれ張力試験用混合液  Wetting Tension Test Mixture  详细产品信息如下:

( ぬれ張力試験用)

(和光纯药Wako中国)  另还常年供应以下表面张力的型号:

235-01791                  No.22.6                  50ml

238-01801                  No.25.4                  50ml

235-01811                  No.27.3                  50ml

232-01821                  No.30.0                  50ml

和光纯药WAKO:Wetting Tension Test Mixture No.34.0  物体表面湿润张力测试液体No.34.0   230-01861  50ml
239-01831                  No.31.0                  50ml

236-01841                  No.32.0                  50ml

233-01851                  No.33.0                  50ml

237-01871                  No.35.0                  50ml

234-01881                  No.36.0                  50ml

231-01891                  No.37.0                  50ml

234-01901                  No.38.0                  50ml

231-01911                  No.39.0                  50ml

238-01921                  No.40.0                  50ml

235-01931                  No.41.0                  50ml

232-01941                  No.42.0                  50ml

239-01951                  No.43.0                  50ml

236-01961                  No.44.0                  50ml

239-01971                  No.45.0                  50ml

230-01981                  No.46.0                  50ml

237-01991                  No.48.0                  50ml

234-02001                  No.50.0                  50ml

231-02011                  No.52.0                  50ml

238-02021                  No.54.0                  50ml

235-02031                  No.56.0                  50ml

和光纯药WAKO:Wetting Tension Test Mixture No.34.0  物体表面湿润张力测试液体No.34.0   230-01861  50ml
232-02041                  No.58.0                  50ml

239-02051                  No.59.0                  50ml

236-02061                  No.60.0                  50ml

233-02071                  No.61.0                  50ml

230-02081                  No.62.0                  50ml

237-02091                  No.63.0                  50ml

230-02101                  No.64.0                  50ml

237-02111                  No.65.0                  50ml

234-02121                  No.67.0                  50ml

231-02131                  No.70.0                  50ml

238-02141                  No.73.0                  50ml