氨[快速]检测试剂盒 Ammonia (Rapid)

氨[快速]检测试剂盒 Ammonia (Rapid)
产品品名:氨快速检测试剂盒
英文品名:Ammonia assay Kit (Rapid)

货号:K-AMIAR
规格型号:96 assays (manual) (手动)/960次(微孔板)/960次(自动分析仪)
氨对地球上的生物相当重要,它是所有食物和肥料的重要成分。氨也是所有药物直接或间接的组成。氨有很广泛的用途,同时它还具有腐蚀性等危险性质。
反应时间:3min
检测限:0.07mg/L
适用样品:葡萄酒、水果汁、软饮料、乳制品(如酸奶)、保健食品、酱、蛋以及蛋产品、奶酪、肉、加工过的肉,海鲜、焙烤食品(和发酵粉)、焙烤食品(和发酵粉)、化肥、纸、医药品、烟、化妆品、水、凯氏定氮、纸(硬纸板)和其他原料(如生物培养基,样品等)
优点:
  •   由于适用不受抑制的谷氢酸脱氢酶,所以反应速度很快
  •   适用于手工和白动分析仪检测
  •   提供的酶为稳定的悬浮液
  •   成本低(每次检测成本
  •   所有试剂配制后的稳定性〉2年
  •   片剂形式增加了稳定性
  •   包含标准品
  •   该实验方法已通过MEBAK和德国的认证
商品说明:
For the rapid assay of ammonia in all samples, including grape juice and wine. Content:96 assays per kit
UV-method for the determination of Ammonia in foodstuffs,
beverages and other materials
Principle:
(microbial glutamate dehydrogenase)
(1) 2-Oxoglutarate + NADPH + NH4+ → L-glutamic acid + NADP+
+ H2O


Kit size:    96 assays (manual) / 960 (microplate)
/ 960 (auto-analyser)
Method:  pectrophotometric at 340 nm
Reaction time: ~ 3 min
Detection limit:  0.07 mg/L
Application examples:
Grape juice, wine, fruit juices, soft drinks, dairy products (e.g. milk),
dietetic food, soy sauce, eggs and egg products, cheese, meat,
processed meat, seafood, bakery products (and baking agents),
fertilisers, pharmaceuticals, tobacco, cosmetics, water, Kjeldahl
analysis, paper (and cardboard), water and other materials
(e.g. biological cultures, samples, etc.)
Method recognition:    
Methods based on this principle have been accepted by MEBAK
Advantages

  • Very rapid reaction due to use of uninhibited glutamate dehydrogenase
  • Enzyme supplied as stabilised suspension
  • Very competitive price (cost per test)
  • All reagents stable for > 2 years as supplied
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included
  • Extended cofactors stability
  • Suitable for manual, microplate and auto-analyser formats
    上海金畔生物科技有限公司(www.jinpanbio.com)提供生命科学研究领域系列产品,包括生化试剂、诊断试剂、实验耗材和仪器色谱标准品。Sigma生化试剂、Abcam、CST、Santa Cruz品牌的单克隆抗体、多克隆抗体以及BD Pharmingen的流式抗体,Invitrogen品牌试剂、R&D和Biovison品牌的ELisa试剂盒、Laysan bio、Avanti、NANOCS品牌的修饰性PEG(修饰性聚乙二醇)、Lumiprobe cy系列活性荧光染料。免疫诊断试剂包括Roche、TOYOBO、NEB品牌的酶、MP bio品牌的生化试剂和Amresco分子生物学试剂。标准品包括Sigma试剂、WAKO食品、农残、环境、水质等分析检测标准品、美国APSC品牌聚合物分子质量测量高分子量标准品、德国Dr和TRC以及药典USP、EP、中检所品牌标准品、Reagecon品牌的离子和各种金属标准品;耗材和仪器包括NUSSUI、BD difco、OXOID品牌的培养基、whatman、Millipore品牌的各种滤膜、滤器和柱子填料等、Reseach diets品牌的动物饲料、Labnet、康宁Corning、Axygen、Falcon 、Eppendorf品牌的离心机离心管、移液枪及枪头等实验室常用仪器耗材。
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内切纤维素酶检测试剂盒

内切纤维素酶检测试剂盒

英文名:Cellulase Assay Kit (CELLG3 Method)

货号:K-CELLG3

规格:180 / 360 assays per kit / 720 (auto-analyser)

市场价: 5537

 纤维素酶是一种重要的酶产品,是一种复合酶,主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成,还有很高活力的木聚糖酶。

提供内切纤维素酶检测试剂盒,色度法(400 nm)测定酶制品和发酵产品中的纤维素酶(内切-1,4-β-葡聚糖酶)。

内切纤维素酶检测试剂盒(CELLG3方法) K-CELLG3

使用高纯度β-葡萄糖苷酶和苯亚甲基阻断,2 – 氯-4 – 硝基苯基-β-Dcellotrioside(BClPNPβ-G3)。 β-葡萄糖苷酶的能力确保测定的可靠的最大的灵敏度。BClPNPβ-G3的水解为苯亚甲基,通过纤维素酶阻断纤维二糖和2-氯-4 -硝基苯基-β-D-葡萄糖, 2-Cl-4-硝基苯基-β-D-葡萄糖通过β-葡萄糖苷酶立即裂解为D-葡萄糖和游离的2 – 氯-4 – 硝基苯酚(ClPNP)。

反应时间:16min

适用样品:酶制品和发酵产品

优点:

价格低廉(每次检测成本)

特异性高

方法简单

包含标准品

 

The CELLG3 assay reagent for the measurement of endo-cellulase (endo-1,4-β-glucanase) contains two components;

1) 4,6-O-benzylidene-2-chloro-4-nitrophenyl-β-D-cellotrioside (BCNPG3) and 2) thermostable β-glucosidase. The benzylidene blocking group prevents any hydrolytic action by the β-glucosidase on BCNPG3.  Incubation with an endo-cellulase generates a non-blocked colourimetric oligosaccharide that is rapidly hydrolysed by the ancillary β-glucosidase.  The rate of formation of 2-chloro-4-nitrophenol is therefore directly related to the hydrolysis of BCNPG3 by the endo-cellulase.  The reaction is terminated and the phenolate colour is developed on addition of Tris buffer solution (pH 9.0).
Please note that a new assay kit (K-CELLG5) is now available for the measurement of endo-cellulase.  The CELLG5 reagent contains a cellopentaose core and exhibits vastly improved sensitivity for some cellulases.  In addition, the exchange of the benzylidene blocking group in CELLG3 for 3-keto-butylidene in CELLG5 improves the substrate’s water solubility significantly, allowing for a reduction in the concentration of DMSO required in the assay.  As DMSO is known to inhibit certain cellulases, this is another benefit in using CELLG5.  Megazyme now recommends the use of K-CELLG5 for all assays for the measurement of endo-cellulase.

Colourimetric method for the determination of 
endo
-1,4-β-glucanase (cellulase) in enzyme preparations and fermentationproducts

Principle:
(endo-1,4-β-glucanase)
(1) 3-Ketobutylidene-G5-β-PNP + H2O → Blocked-GX + G(5-X)-β-PNP

(thermostable β-glucosidase)
(2) G(5-X)-β-PNP + H2O → D-glucose + PNP

(alkaline solution)
(3) PNP → phenolate ion (yellow colour)
Note: PNP = 4-nitrophenol

Kit size:
K-CELLG5-4V 120 / 240 assays (manual) / 480 (auto-analyser)
or
K-CELLG5-2V 60 / 120 assays (manual) / 240 (auto-analyser)

Method:                         Spectrophotometric at 400 nm
Total assay time:           10 min
Detection limit:                3.5 x 10-4 U/mL
Application examples:
Fermentation broths, industrial enzyme preparations, biofuels research
Method recognition:     Novel method

 

甘油检测试剂盒

 

甘油检测试剂盒 Glycerol Assay Kit

产品货号:K-GCROL

产品品名: 甘油检测试剂盒

英文品名 :Glycerol Assay Kit

规格型号: 70 assays per kit

甘油是食品加工业中通常使用的甜味剂和保湿剂,大多出现在运动食品和代乳品中。

The Glycerol test kit is a simple, reliable, rapid and accurate method for the measurement and analysis of Glycerol in beverages, foodstuffs and other materials.
Suitable for manual and microplate formats.

UV-method for the determination of Glycerol in foodstuffs,
beverages and other materials

原理: (glycerokinase)
(1) Glycerol + ATP → L-glycerol-3-phosphate + ADP

(pyruvate kinase)
(2) ADP + PEP → ATP + pyruvate

(L-lactate dehydrogenase)
(3) Pyruvate + NADH + H+ → L-lactic acid + NAD+

反应时间: 5min

检测限: 0.37mg/L

适用样品: 葡萄酒(葡萄汁)、啤酒、烈酒、醋、杏仁蛋白软糖、果汁、软饮料、牙膏、蜂蜜、烟、纸(硬纸板)、化妆品

优点:

l    新型的片剂形式增加了稳定性

l    价格低廉(每次检测成本)

l    所有试剂配制后的稳定性 >2 年

l    反应快

l    该方法已通过 OIV , MEBAK 以及德国和瑞士的认证

REFERENCES:

  1.         Spinella, C. I. (1966). Modified enzymatic procedure for the routine determination of glycerol  and triglycerides in plasma.  J. Lipid Res ., 7,167-169 .
  2.  Klopper, W. J., Angelino, S. A. G. F., Tuning, B. & Vermeire, H. A. (1986). Organic acids and  glycerol in beer.  J. Inst. Brew ., 92, 225- 228.
  3.         Michal, G. (1976). Enzymatische analyse in der pharmazie.  Acta Pharmaceutica  Technologica , Suppl. 1, S, 151-162.
  4.         Pfandl, A. & Menschig, D. (1984). Ein beitrag zur enzymatischen glycerin- und  ethanol-bestimmung.  Pharm. Ind ., 46, 403-407.
  5.         Wieland, O. H. (1988). Glycerol. In  Methods of Enzymatic Analysis  (Bergmeyer, H. U., ed.),  3rd ed., Vol. VI, pp. 504-510, VCH Publishers (UK) Ltd., Cambridge, UK.

L-苹果酸检测试剂盒

L-苹果酸检测试剂盒L-Malic Acid Assay Kit (Manual Format)

产品货号: K-LMALL

产品品名: L- 苹果酸检测试剂盒(大)

英文品名: L-Malic Acid Assay Kit (Large)

规格型号: 116 assays

原理:

反应时间: 3min

检测限: 0.25 mg/L,

适用样品: 饮料和食品以及其他原料

优点:

l    成本低

l    使用期间所有试剂的稳定性 >2 年

l    操作简单

l    包含标准品

REFERENCES:

  1. Mollering, H. (1985). L-Malate. In  Methods of Enzymatic Analysis  (Bergmeyer, H. U., ed.), 3rd ed., Vol. VII, pp. 39-47, VCH Publishers (UK) Ltd., Cambridge, UK.
  2. AOAC Official Methods of Analysis (2002). Method 993.05 “L-Malic acid/total malic acid ratio in apple juice”. 17th ed. Chapter 37, p. 15.
  3. Gorin, N. (1976). Differences in L-malate determined enzymatically or titrimetrically in golden delicious apples.  Zeitschrift fur Lebensmittel-Unterschung und-Forschung,  162, 259-261.
  4. Klopper, W. J., Angelino, S. A. G. F., Tuning, B. & Vermeire, H. A. (1986). Organic acids and glycerol in beer.  J. Inst. Brew.  92, 225-228.
  5. Elkins, E. R. & Freund, W. (1994). Detection of adulteration in apple juice by L-malic/total malic acid ratio: Collaborative Study.  J. AOAC Int . 77, 411-415.
商品说明:

L-Malic Acid (Regular) Assay Kit, for the specific assay of L-malic acid (L-malate) in beverages and food products.

Manual format UV-method for the determination of L-Malic Acid in foodstuffs, beverages and other materials

Principle:
(L-malate dehydrogenase)
(1) L-Malic acid + NAD+ ↔ oxaloacetate + NADH + H+

(glutamate-oxaloacetate transaminase)
(2) Oxaloacetate + L-glutamate → L-aspartate + 2-oxoglutarate

Kit size: (K-LMALR)
58 assays (manual) / 580 (microplate) or
(K-LMALL)
116 assays (manual) / 1160 (microplate)
Method: Spectrophotometric at 340 nm
Reaction time: ~ 3 min
Detection limit: 0.25 mg/L
Application examples:
Wine, beer, fruit juices, soft drinks, candies, fruit and vegetables,
bread, cosmetics, pharmaceuticals and other materials (e.g. biological
cultures, samples, etc.)
Method recognition:
Methods based on this principle have been accepted by AOAC, EEC,
EN, NF, NEN, DIN, GOST, OIV, IFU, AIJN and MEBAK

Advantages

  • PVP incorporated to prevent tannin inhibition
  • Both enzymes supplied as stable suspensions
  • Very competitive price (cost per test)
  • All reagents stable for > 2 years after preparation
  • Very rapid reaction (~ 3 min)
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included
  • Extended cofactors stability
  • Suitable for manual and microplate format

膳食纤维总量检测试剂盒 Total Dietary Fibre Assay Kit

膳食纤维总量检测试剂盒 Total Dietary Fibre Assay Kit

       在生命科学领域,上海金畔生物为业界提供了丰富的实验室和生物医药生产研发的产品。庆祝上海金畔生物正式成为膳食纤维总量检测试剂盒 Total Dietary Fibre Assay Kit的签约代理商,在这里要感谢广大客户多年来对上海金畔生物科技有限公司的支持和厚爱,我们将一如既往的为广大客户带来膳食纤维总量检测试剂盒 Total Dietary Fibre Assay Kit高品质的产品和服务,欢迎广大新老客户来电咨询。
膳食纤维总量检测试剂盒 Total Dietary Fibre Assay Kit
规格:200 assays per kit
库存状态:现货
      膳食纤维是一种多糖,它既不能被消化吸收,也不能产生能量。因此,曾一度被认为是一种“无营养物质”。后来发现了膳食纤维具有相当重要的生理作用。并被营养学界补充认定为第七类营养素,和传统的六类营养素——蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质与水并列。

1.可溶性膳食纤维(来源于果胶、藻胶、魔芋等。魔芋盛产于我国四川等地,主要成分为葡甘聚糖)
2.不可溶性膳食纤维(全谷类粮食,其中包括麦麸、麦片、全麦粉及糙米、燕麦全谷类食物、豆类、蔬菜和水果等。)
  1. 简介:

膳食纤维是指碳水化合物及其相类似物质的总和,包括多糖、寡糖、木质素以及相关的植物物质。主要有纤维素、半纤维素、果胶及亲水胶体物质,如树胶、海藻多糖等组分;另外还包括植物细胞壁中所含有的木质素;不被人体消化酶所分解的物质,如抗性淀粉、抗性糊精、抗性低聚糖、改性纤维素、黏质、寡糖以及少量相关成分,如蜡纸、角质、软木脂等。

总膳食纤维检测试剂盒是根据AOAC991.43,AOAC 985.29,AACC32-07和AACC 32-05方法开发的,也适用于其它方法,如AACC Method 32-21,AACC method32-06。

  1. 检测原理

脱脂(如大于10%)干燥后的样品经热稳定a-淀粉酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解消化,酶解液通过乙醇沉淀、过滤,乙醇和丙酮洗涤残渣后干燥、称重,得到总膳食纤维(TDF)残渣;

酶解液通过直接过滤、热水洗涤残渣,干燥后称重,得到不溶性膳食纤维(IDF)残渣;

滤液用乙醇沉淀,过滤、干燥、称重,得到可溶性膳食纤维(SDF)残渣。

TDF、IDF和SDF的残渣扣除蛋白质、灰分和空白即得TDF、IDF和SDF含量。

该检测试剂盒的主要优势在于直接提供高纯度的酶,酶的活力是标准化的,而标准化的a-淀粉酶的活力在测量抗性淀粉是公认的。

淀粉葡萄糖苷酶中基本没有纤维素酶,而其他常用的酶制剂中常含有这种污染物,这将导致溶解和低估β-葡聚糖。

该试剂盒提供的酶都是稳定的液体,可以保存到试剂盒有效期,并且是直接应用液,不需要使用前再溶解。

  1. 用途

适用于检测谷物、水果、蔬菜和加工食品中的总膳食纤维(TDF)、不溶性

膳食纤维(IDF)和可溶性膳食纤维(SDF)的检测。

  1. 提供试剂及材料

每一个盒中的提供的酶试剂足够进行200个试验,如另外需要可单独订货:

Bottle 1 ,1瓶:

热稳定a-淀粉酶(20mL,~ 3,000 U/mL,Ceralpha method;~ 10,000 U/mL on

soluble starch。).

Bottle 2,1瓶:

纯化的蛋白酶(20mL,50 mg/mL; ~ 350 tyrosine Units/mL。)

Bottle 3,2瓶:

淀粉葡萄糖苷酶(20mL,3300 U/mL on soluble starch。)

总计:80ml(4瓶20ml包装)

另外,实验中需要用到硅藻土需要单独购买。

其他相关试剂盒:

膳食纤维质控试剂盒(货号:K-TSCK)

质控试剂盒用于检验酶的效力和纯度,含下表中所列物质每种一瓶,并附有技术数据单(K-TSCK),盒中每种物质足够10次测试用。

品种 数量
β-葡聚糖(大麦) 1.0g
高直链玉米淀粉 10.0g
淀粉(小麦) 10.0g
酪蛋白 5.0g
果胶 1.0g 
  1. 需要的设备和试剂

5.1 设备

  1. 高型无导流口烧杯:400mL或600mL
  2. 坩埚:具粗面烧结玻璃板,孔径40-60 μm。清洗后在马福炉中525℃灰化6小时或过夜,用真空泵除去硅藻土和灰分,室温下用2%清洗液浸泡1小时,用水和蒸馏水冲洗干净,用15 mL丙酮冲洗后风干,加1g硅藻土到干燥的坩埚中,在130℃干燥至恒重,在干燥器中冷却1小时,记下坩埚(包括硅藻土)的重量。
  3. 真空溶剂过滤装置:真空泵或有调节装置的抽吸器,1L的抽滤瓶,侧壁有抽滤口,以及抽滤瓶配套的橡胶塞。用于酶解液的抽滤。
  4. 恒温振荡水浴:95-100℃
  5. 分析天平:感量0.1mg
  6. 天平(台秤):4 000g量程,感量0.1g
  7. 马福炉:525±5°C,
  8. 烘箱:103±2℃,130±3℃
  9. 真空干燥箱
  10. 干燥器:二氧化硅或等同干燥剂
  11. PH计,具有温度补偿功能。
  12. 微量凯氏定氮仪。
  13. 移液器,50-200 μL,5 mL,一次性移液吸头。
  14. 计时器。
  15. 橡胶刮勺
  16. 磁力搅拌器

5.2 试剂

  1. 95%乙醇(体积比),
  2. 78 %乙醇:取821mL95%乙醇置于容量瓶中,用水稀释到刻度,混匀。
  3. 丙酮
  4. 蒸馏水或去离子水
  5. 清洗液Micro (International Products Corp.,Trenton,NJ).,配成2%液体
  6. MES/TRIS缓冲液(0.05mol/L):称取19.52g (MES) (Sigma, M 8250)和14.2 g

(TRIS) (Sigma,T1503),用1.7L蒸馏水溶解,用6mol/L氢氧化钠调节PH至

8.2±0.1,加水稀释到2L(注意24℃时PH值为8.2,20℃时PH值为8.3,27-28℃

时PH值为8.1)

  1. 盐酸溶液(0.561 mol/L):取93.5mL 6 mol/L的盐酸,加入700mL水中,混匀

后用水定容到1L。

  1. 氢氧化钠
  2. PH值标准缓冲液:PH值为 4.0,7.0 和10.0。

 

  1. 酶的纯化和标准化

6.1 根据AACC/AOAC的膳食纤维检测方法,必须确保酶的纯度。

6.1.1 淀粉葡萄糖苷酶被木聚糖酶、纤维素酶和果胶酶污染,会低估β-葡聚糖、

阿拉伯木聚糖和果胶的含量。

6.1.2 热稳定a-淀粉酶被污染,会影响抗性淀粉的测量。

6.1.3 蛋白酶被4-β-葡聚糖酶污染,会低估β-葡聚糖的含量。

6.1.4 如不是使用该酶,请参考下面方法测定。

Test Sample Activity Tested Sample Wt(g) Expected Recovery (%)
Citrus pectin Pectinasea 『1』 0.1 90-95 『3』
ß-Glucan (barley) ß-glucanase (cellulase) 『1』 0.1 95-100
Wheat starch Amylase 『2』 1.0 0-1
Casein Protease 『2』 0.3 0-2
High amylose starch Amylase 1.0 ~30   『4』

注解:

『1』:没有酶活力作用。

『2』:最大酶活力作用

『3』:除很少量的柑橘果胶全部沉淀

『4』:含有大量抗性淀粉,准确回收率的数值影响热稳定a-淀粉酶的使用量。

6.2 根据AACC/AOAC的膳食纤维检测方法,必须对酶标准化测定,如果不是使用该的酶,请按以下方法测定

6.2.1 淀粉葡萄糖苷酶,0.2 mL,

— 酶活力表示方法1:淀粉/葡萄糖酶-过氧化物酶法,3300 U/mL,1个酶活力单位定义为:40°C,PH值4.5时,每分钟释放1 μmol葡萄糖所需要的酶量。

— 酶活力表示方法2:对-硝基苯基-b-麦芽糖苷(PNPBM)法,200 U/mL, 1个酶活力单位(1PNP单位))定义为:40°C,有过量萄糖苷酶存在下,每分钟从对硝基苯基-β-麦芽糖苷释放1 μmol 对硝基苯基所需要的酶量。

6.2.2 热稳定a-淀粉酶,0.05 mL,

— 酶活力表示方法1:以淀粉为底物,以Nelson/Somogyi还原糖表示,10000U/mL ,1个酶活力单位定义为:40°C,PH值6.5时,每分钟释放1 μmol葡萄糖所需要的酶量。

— 酶活力表示方法2:对硝基苯基麦芽糖为底物,3,000 U/mL(Ceralpha),1个酶活力单位定义为:40°C,PH值6.5时,每分钟释放1 μmol对-硝基苯基所需要的酶量。

6.2.3 蛋白酶,0.10 mL

— 酶活力表示方法1:酪蛋白测试,350 U/mL或50 mg/mL或7 Tyrosine U/mL,1个酶活力单位定义为:40°C,PH值8.0时,每分钟从可溶性酪蛋白中水解出(并溶于三氯乙酸)1 μmol酪氨酸所需要的酶量。

— 酶活力表示方法2:偶氮酪蛋白测试,350 U/mL或50 mg/mL或7 Tyrosine U/mL,1个内肽酶活力单位定义为:40°C,PH值8.0时,每分钟从可溶性酪蛋白中水解出(并溶于三氯乙酸)1μmol酪氨酸所需要的酶量。该偶氮酪蛋白(货号:S-AZCAS).

 

  1. 检测步骤

7.1 试样制备

准确称取双份试样各1 g,质量差小于0.005g,精确到0.1mg,置于400mL或600mL高型烧杯中,同时制备双份空白样,在每个烧杯中加入40 mL PH值8.2的MES-TRIS缓冲液,磁力搅拌,直到试样完全分散到缓冲液中。

7.2 热稳定a-淀粉酶酶解:加入50 μL热稳定a-淀粉酶溶液,加盖铝箔,置于95-100°C恒温振荡水浴中持续振摇,当所有烧杯全部放入水浴开始计时,反应35分钟。

7.3 冷却:将烧杯取出玲却到60°C,除去铝箔盖,用刮勺将烧杯内壁和底部的胶状物刮下,用10 mL蒸馏水冲洗烧杯壁和刮勺。

7.4 蛋白酶酶解:在每个烧杯中各加入100 μL蛋白酶溶液,加盖铝箔,置于60°C恒振荡水浴中,当烧杯内温度达到60°C开始计时,持续反应30分钟。

7.5 PH值调节:反应30分钟后,边搅拌边加入0.561 mol/L盐酸,严格控制60°C,用 1mol/L氢氧化钠溶液或 1mol/L盐酸溶液,控制PH值在4.5±0.2。

7.6 淀粉葡萄糖苷酶酶解:在上述溶液中边搅拌边加入200 μL淀粉葡萄糖苷酶溶液,加盖铝箔,置于60°C恒温振荡水浴中,持续振摇,当烧杯内温度达到60°C开始计时,反应30分钟。

  1. 测定

8.1 不溶性膳食纤维测定:

8.1.1 过滤洗涤:试样酶解液全部转移到坩埚中过滤,残渣用10mL预热到70°C的蒸馏水洗涤两次,合并过滤液,转移至另一600mL高脚烧杯中,备测可溶性膳食纤维。残渣分别用10mL 95%乙醇和丙酮洗涤两次,抽滤去除洗涤液,将坩埚连同残渣在103°C烘干过夜,将坩埚置于干燥器中冷却1小时,称重(包括坩埚、膳食纤维残渣和硅藻土),精确至0.1mg,减去坩埚和硅藻土的干重,计算残渣质量。

8.1.2 蛋白质和灰分测定:称完质量的残渣和硅藻土的混合物,一份用凯氏定氮法,以N×6.25为换算系数,计算蛋白质质量。另一份在525°C灰化5小时,于干燥器中冷却,精确称量坩埚总量(精确至0.1mg)减去坩埚和硅藻土干重,计算灰分质量。

8.2 可溶性膳食纤维测定

8.2.1 计算滤液体积:将不可溶性膳食纤维过滤后的滤液收集到600mL的高型烧杯中,通过烧杯+滤液总重扣除烧杯质量的方法估算滤液的体积。

8.2.2 沉淀:将滤液加入4倍体积预热60°C的95%乙醇,或取80g滤液加入320mL预热60°C的95%乙醇室温下沉淀1小时。

8.2.3 过滤:在干燥的坩埚中加入1g硅藻土,70°C真空干燥至恒重,记录坩埚的质量(精确到0.1mg)。用15mL 78%乙醇将硅藻土润湿,并用真空溶剂过滤装置在抽真空条件下,使硅藻土平铺于坩埚中。将样品酶解液缓慢转移至对应的坩埚中,抽滤。用刮勺和78%乙醇将所有残渣转至坩埚中。

8.2.4 洗涤:分别用15mL 78%乙醇、15mL 95%乙醇和15mL丙酮洗涤残渣各两次,抽滤去除洗涤液后,将坩埚连同残渣在105°C烘干过夜。将坩埚置于干燥器中冷却1小时,称重(包括坩埚、膳食纤维残渣和硅藻土),精确至0.1mg。减去坩埚和硅藻土的干重,计算残渣质量。

8.2.5 蛋白质和灰分测定:称完质量的残渣和硅藻土的混合物,一份用凯氏定氮法,以N×6.25为换算系数,计算蛋白质质量,另一份在525°C灰化5小时,于干燥器中冷却,精确称量坩埚总量(精确至0.1mg)减去坩埚和硅藻土干重,计算灰分质量。

8.3 总膳食纤维检测检测

8.3.1 沉淀:在每份试样中加入预热至60°C的95%乙醇225mL(预热后的体积,如乙醇的温度超过65°C,则加入228mL),乙醇与样液体积比为4:1,取出烧杯,盖上铝箔,室温下沉淀1小时。建议改为:称量酶解液的质量,用天平加入4倍质量的预热的60°C的95%乙醇,4°C冰箱中沉淀过夜。

8.3.2 过滤:在干燥的坩埚中加入1g硅藻土,70°C真空干燥至恒重,记录坩埚的质量(精确到0.1mg)。用15mL 78%乙醇将硅藻土润湿,并用真空溶剂过滤装置在抽真空条件下,使硅藻土平铺于坩埚中。将样品酶解液缓慢转移至对应的坩埚中,抽滤。用刮勺和78%乙醇将所有残渣转至坩埚中。

8.3.3 洗涤:分别用15mL 78%乙醇、15mL 95%乙醇和15mL丙酮洗涤残渣各两次,抽滤去除洗涤液后,将坩埚连同残渣在105°C烘干过夜。将坩埚置于干燥器中冷却1小时,称重(包括坩埚、膳食纤维残渣和硅藻土),精确至0.1mg。减去坩埚和硅藻土的干重,计算残渣质量。

8.3.4 蛋白质和灰分测定:称完质量的残渣和硅藻土的混合物,一份用凯氏定氮

法,以N×6.25为换算系数,计算蛋白质质量。,另一份在525°C灰化5小时,

于干燥器中冷却,精确称量坩埚总量(精确至0.1mg)减去坩埚和硅藻土

干重,计算灰分质量。

  1. 计算:

DF(%)=『(R1+R2)/2-p-A-B』/『(M1+M2)/2』*100%

式中:

DF=样品中膳食纤维含量(TDF、IDF、SDF),%

R1 和R2=双份样品残渣的质量,单位为毫克(mg)

m1 和m2=双份样品的质量,单位为毫克(mg)

A=灰分的质量,

P=蛋白的质量

B=空白=(BR1+BR2)/2-BP-BA

BR1 和BR2=双份试样空白残渣的质量

BP=试样空白蛋白的质量

BA=试样空白灰分的质量

可以使用该的计算软件Mega-CalcTM进行自动计算。

方法二

根据AACC method 32-05 和AOAC Method 985.29方法测定

  1. 仪器设备和同方法一
  2. 试剂和溶液
  3. 280±2.0 mL 95 %乙醇

b.10±0.5 mL 78 %乙醇

  1. 50±0.5 mL缓冲液
  2. 磷酸盐缓冲液(0.08mol/L,PH值6.0): 取1.400g Na2HPO4和9.68g NaH2PO4

溶解在700mL蒸馏水中,用水定容到1L,用PH计检查PH值。

  1. 氢氧化钠溶液(0.275mol/L):去11g氢氧化钠溶解在700mL蒸馏水中,冷却转

移到容量瓶中,用水定容到1L。

  1. 盐酸溶液(0.325 mol/L):取 325 mL 1.0 mol/L 盐酸置于容量瓶中,用水定容

到1L。

  1. 样品准备

总膳食纤维的测定必须是低脂或无脂的干燥样品,取混匀后的样品于70°C真

空干燥过夜,干燥器中冷却,再称重记录重量损失,干样粉碎后过0.3-0.5 mm

筛,若试样不能加热,则冷冻干燥后再粉碎过筛。如果是高脂肪样品(> 10 %),

取经过干燥的样品分别用25mL石油醚脱脂三次,干燥后记录脱脂的质量损失,

最后计算总膳食纤维含量时进行进行校正,粉碎过筛后的干燥试样放在干燥

器中待用。

  1. 分析步骤

准确称取双份试样各1 g,质量差小于0.005g,精确到0.1mg,置于400mL或

600mL高型烧杯中,同时制备双份空白样,在每个烧杯中加入50 mL PH值6.0

的磷酸盐缓冲液,磁力搅拌,直到试样完全分散到缓冲液中,控制PH值6.0±0.1。

4.2 热稳定a-淀粉酶酶解:加入50 μL热稳定a-淀粉酶溶液,加盖铝箔,置于沸腾

水浴中15分钟,每5分钟轻轻振荡一次。当烧杯内的温度到100°C开始计时,

总共大约30分钟。

4.3 冷却:将烧杯取出冷却到室温,加入10 mL 0.275mol/L 的氢氧化钠,调节

PH值在7.5±0.1。

4.4 蛋白酶酶解:在每个烧杯中各加入100 μL蛋白酶溶液,加盖铝箔,置于60°C

恒振荡水浴中,当烧杯温度达到60°C开始计时,持续反应30分钟。

4.5 冷却:加入10 mL 0.325 mol/L盐酸,调节PH值在4.5±0.2。

4.6 淀粉葡萄糖苷酶酶解:在上述溶液中边搅拌边加入200 μL淀粉葡萄糖苷酶溶

液,加盖铝箔,置于60°C恒温振荡水浴中,持续振摇,当烧杯内温度达到60°C

开始计时,反应20分钟。

4.7 在每份试样中加入预热至60°C的95%乙醇280mL(预热前的体积),乙醇与样

液体积比为4:1,取出烧杯,盖上铝箔,室温下沉淀1小时。

4.8 过滤:在干燥的坩埚中加入1g硅藻土,70°C真空干燥至恒重,记录坩埚的质

量(精确到0.1mg)。用15mL 78%乙醇将硅藻土润湿,并用真空溶剂过滤装置

在抽真空条件下,使硅藻土平铺于坩埚中。将样品酶解液缓慢转移至对应的

坩埚中,抽滤。用刮勺和78%乙醇将所有残渣转至坩埚中。

4.9 洗涤:分别用20mL 78%乙醇洗涤3次、10mL 95%乙醇和10mL丙酮洗涤残渣

各两次,抽滤去除洗涤液后,将坩埚连同残渣在105°C烘干过夜或70°C真空

干燥过夜。将坩埚置于干燥器中冷却1小时,称重(包括坩埚、膳食纤维残渣

和硅藻土),精确至0.1mg。减去坩埚和硅藻土的干重,计算残渣质量。

4.10 蛋白质和灰分测定:称完质量的残渣和硅藻土的混合物,一份用凯氏定

氮法,以N×6.25为换算系数,计算蛋白质含量。另一份在525°C灰化5小时,

于干燥器中冷却,精确称量坩埚总量(精确至0.1mg)减去坩埚和硅藻土干重,

计算灰分质量。

计算:

未校正的平均空白残渣 (UABR)=平均试样空白残渣质量,单位为毫克

未校正空白蛋白残渣(BPR)=UABR x %空白蛋白/100

未校正空白灰分残渣(BAR)=UABR x %空白灰分/100

校正的空白(CB)= UABR – BPR – BAR

未校正的平均样品残渣 (USAR)=平均试样空白残渣质量,单位为毫克

未校正样品蛋白残渣(SPR)=UABR x %空白蛋白/100

未校正样品灰分残渣(SAR)=UABR x %空白灰分/100

校正的样品(CSR)= USAR-SPR-SAR-CB% TDF= 100 x CSR/样品质量mg最终的% TDF是去除了和水分后的总膳食纤维含量。

10、参考文献:

  1. Association of Official Analytical Chemists (1985). Official Methods of Analysis, 14th ed., 1st suppl. Secs. 43, A14-43,A20, p.399.
  2. Association of Official Analytical Chemists (1986). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 69:370.
  3. Association of Official Analytical Chemists (1987). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 70:393.
  4. Prosky, L., Asp, N.-G., Furda, I., DeVries, J.W., Schweizer, T.F.and Harland, B.F. (1985). Determination of total dietary fibre in foods and food products: Collaborative study. J. Assoc. Off. Anal.Chem., 68:677.
  5. Prosky, L., Asp, N.-G., Schweizer, T.F., DeVries, J.W. and Furda,I. (1988). Determination of insoluble, soluble, and total dietary fibre in

foods and food products. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 71:1017.16

Total Dietary Fiber Assay Kit

The Total Dietary Fiber test kit is suitable is suitable for the measurement and analysis of Total Dietary Fiber.

For the determination of Total Dietary Fiber in cereal products,
foodstuffs, feeds and other materials
Principle:
(α-amylase + amyloglucosidase)
(1) Starch + H2O → D-glucose(protease)
(2) Protein + H2O → peptides(3) Dietary fiber determined gravimetrically following alcohol
precipitation

(4) Ash and residual protein determined on DF residues
and subtracted

Kit size: 100 / 200 assays
Method: Hydrolysis / removal of non-dietary
fibre components
Total assay time: ~ 100 min
Detection limit: 0.5-100% of sample weight
Application examples:
Food ingredients, food products and other materials
Method recognition:
AOAC (Methods 985.29, 991.42, 991.43 and 993.19), AACC
(Methods 32-05.01, 32-06.01, 32-07.01 and 32-21.01) and
CODEX (Type I Method)

Total Dietary Fiber Assay Kit, for the measurement and analysis of total, soluble and insoluble dietary fiber according to AOAC and AACC approved methods. See General Referee Reports: Journal of AOAC INTERNATIONAL, Vol. 81, No. 1, 1998.
Fiber is a mixture of complex organic substances, including hydrophilic compounds, such as soluble and insoluble polysaccharides and non-digestable oligosaccharides, as well as a range of non-swellable, more or less hydrophobic, compounds such as cutins, suberins and lignins. The procedures for the determination and analysis of total dietary fiber as outlined in our booklet are based on the methods of Lee et al.1 and Prosky et al.2,3 (AOAC 991.43, AOAC 985.29, AACC 32-07.01 and AACC 32-05.01). However, the enzymes in the Megazyme Total Dietary Fiber Kit can also be used in other dietary fiber analytical methods such as AACC Method 32-21.01 and AACC Method 32-06.01.
1. Association of Official Analytical Chemists. (1985). Official Methods of Analysis, 14th ed., 1st suppl. Secs. 43, A14-43, A20, p.399.
2. Association of Official Analytical Chemists. (1986). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 69, 370.
3. Association of Official Analytical Chemists. (1987). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 70, 393.
Two separate methods are described in the associated data booklet:
METHOD 1:
DETERMINATION OF TOTAL, SOLUBLE AND INSOLUBLE DIETARY FIBER
Based on AOAC Method 991.43 “Total, Soluble, and Insoluble Dietary Fiber in Foods” (First Action 1991) and AACC Method 32-07.01 “Determination of Soluble, Insoluble, and Total Dietary Fiber in Foods and Food Products” (Final Approval 10-16-91).
METHOD 2:
DETERMINATION OF TOTAL DIETARY FIBER
Based on AACC method 32-05.01 and AOAC Method 985.29.

Advantages

  • Very competitive price (cost per test)
  • All reagents stable for > 2 years
  • High purity / standardised enzymes employed
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Simple format
    上海金畔生物科技有限公司(www.jinpanbio.com)提供生命科学研究领域系列产品,包括生化试剂、诊断试剂、实验耗材和仪器色谱标准品。Sigma生化试剂、Abcam、CST、Santa Cruz品牌的单克隆抗体、多克隆抗体以及BD Pharmingen的流式抗体,Invitrogen品牌试剂、R&D和Biovison品牌的ELisa试剂盒、Laysan bio、Avanti、NANOCS品牌的修饰性PEG(修饰性聚乙二醇)、Lumiprobe cy系列活性荧光染料。免疫诊断试剂包括Roche、TOYOBO、NEB品牌的酶、MP bio品牌的生化试剂和Amresco分子生物学试剂。标准品包括Sigma试剂、WAKO食品、农残、环境、水质等分析检测标准品、美国APSC品牌聚合物分子质量测量高分子量标准品、德国Dr和TRC以及药典USP、EP、中检所品牌标准品、Reagecon品牌的离子和各种金属标准品;耗材和仪器包括NUSSUI、BD difco、OXOID品牌的培养基、whatman、Millipore品牌的各种滤膜、滤器和柱子填料等、Reseach diets品牌的动物饲料、Labnet、康宁Corning、Axygen、Falcon 、Eppendorf品牌的离心机离心管、移液枪及枪头等实验室常用仪器耗材。
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爱尔兰Megazyme酶 Enzymes

爱尔兰Megazyme酶 Enzymes

       爱尔兰Megazyme是一家全球领先的制造和供应高品质和创新的检测谷物,食品,饲料,发酵,乳制品和葡萄酒行业的技术。Megazyme成立于1988年,该公司目前提供了超过70种诊断试剂盒和超过300种其他试剂和底物。

该公司产品分以下系列:

1. 生物及食品酶法分析试剂盒 (Diagnostic Kits)
2. 试剂混合物(Reagent Mixtures)
3. 协同因子(Cofactors)
4. 糖酶片剂试验(Carbohydrase Tablet Tests)
5. 蛋白酶片剂试验(Protease Test Tablets)
6. 可溶性呈色底物(Soluble Chromogenic Substrates)
7. 不可溶性(交联的)呈色底物(Insoluble (Crosslinked) Chromogenic Substrates)
8. 酶(Enzymes)
9. 植物凝血素(Lectins)
10. 多聚糖(Polysaccharides)
11. 低聚糖(Oligosaccharides)
12. 相关产品 (General)

 英文名称  酶中文名 规格(酶活性Units) 货号
Acetate Kinase(E.coli) 醋酸激酶[大肠杆菌] 100000 E-ACKEC
RecAcetyl-CoA ynthetase (B.subtilis) Acetyl-CoA合成酶[枯草杆菌] 250 E-ACSBS
Adenylate Kinase (Myokinase)(prokaryote) 转化腺苷酸激酶[肌激酶][原核生物] 10000 E-AMPK
Alcohol dehydrogenase(E.coli) 乙醇脱氢酶[大肠杆菌] 1000 E-ADHEC
Alpha-Amylase(A.oryzae) Alpha淀粉酶[米麴菌] 20000 E-ANAAM
Alpha-Amylase(B.licheniformis) Alpha淀粉酶[苔藓杆菌] 120000 E-BLAM
β-Amylase(Barley) Beta淀粉酶[大麦] 100000 E-BARBL
β-Amylase(Barley) Beta淀粉酶[大麦] 2g E-BARBP
β-Amylase(B.cereus) Beta淀粉酶[仙人掌杆菌] 100,000 E-BCBAM
Amyloglucosidase(A.niger) 淀粉葡萄糖苷酶[黑曲霉] 140,000 E-AMGDF
Amyloglucosidase(Rhizopus sp.) 淀粉葡萄糖苷酶[根霉] 5,000 E-AMGPU
endo-1,5-α-L-Arabinanase(A.niger) 1,5-α-L-阿拉伯糖内切酶[黑曲霉] 140 E-EARAB
α-L-Arabinofuranosidase(A.niger)) α-L-阿拉伯呋喃糖酶[黑曲霉] 300 E-AFASE
Recα-L-Arabinofuranosidase(Novel Specificity) α-L-阿拉伯呋喃糖酶[新] 400 E-AFAM2
Alpha-aspartyl dipeptiease(E.coli) Alpha-天冬氨酰二肽酶[大肠杆菌] 2,000 E-DIPEP
Celobiohydrolase I(T.longibrachiatum) 纤维素二糖水解酶I[长枝木霉] 20mg E-CBHI
Cellulase(endo-1,4-D-Glucanase)(T.longibrachiatum) 纤维素酶[1,4-D-葡聚糖内切酶[长枝木霉] 1,000 E-CELTR
Cellulase(endo-1,4-D-Glucanase)(T.emersonii) 纤维素酶[1,4-D-葡聚糖内切酶[Emersonii蓝状菌] 2,000 E-CELTE
Celluase(endo-1,4-D-glucanse)(A.niger) 纤维素酶[1,4-D-葡聚糖内切酶[黑曲霉] 2,000 E-CELAN
Reccitrate synthase(E.coli) 柠檬酸合酶[大肠杆菌] 50 E-CITEC
Cytidylate Kinase(Prokaryote) 胞嘧啶核苷酸激酶[原核生物] 500 E-CMPK
RecDiaphorase(D.coli) 黄递酶[大肠杆菌] 1,000 E-DIAEC
Formate dehydrogenase(C.boidini) 甲酸脱氢酶[C.boidini] 300 E-FDHCB
CructanaseMixture(Purified) 果糖酶混合物[已纯化] 40ml E-FRMXLQ
Fructanase Mixture Powder 果糖酶混合物 40,000 E-FRMXPD
endo-1,4-β-D-Galactanase(A.niger) 1,4-β-D-半乳糖内切酶[黑曲霉] 1,000 E-EGALN
RecGalactose Dehydrogenase(soli prokaryote) 半乳糖脱氢酶[土壤原核生物] 200 E-GALDH
α-Galactosidase(A.niger) α半乳糖苷酶[黑曲霉] 2,000 E-AGKAN
α-Galactosidase(G.uar) α半乳糖苷酶[瓜尔豆] 600 E-AGLGU
β-Galactosidase(A.niger) β半乳糖苷酶[黑曲霉] 8,000 E-BGLAN
β-Galactosidase(Lactase)(K.fragilis) β半乳糖苷酶[乳糖酶][脆壁克鲁维酵母] 4,000 E-LACTS
endo-1,3-β-Glucanase(Trichoderma.sp.) 1,3-β-D葡聚糖内切酶[木霉菌] 100 E-LAMSE
exo-1,3-β-Glucanase(Trichoderma.sp.) 1,3-D-β-葡聚糖外切酶[木霉菌] 400 E-EXBGL
Gluconokinase(E.coli) 葡糖酸激酶[大肠杆菌] 1,500 E-GLUKEC
Glucose 6-phosphate dehydrogenase 葡萄糖6磷酸脱氢酶 5,000 E-GPDH5
Glucose 6-phosphate dehydrogenase 葡萄糖6磷酸脱氢酶 25,000 E-GPDH25
a-Glucosidase(Maltase)(yeast) Alpha葡[萄]糖苷酶[麦芽糖酶][酵母] 2,000 E-MALTS
a-Glucosidase(B.stearothermophilus) Alpha葡[萄]糖苷酶[嗜热脂肪芽孢杆菌] 1,500 E-TSAGL
a-Glucosidase(Transglucosidase)(A.niger) Alpha葡[萄]糖苷酶[转葡萄糖苷酶][黑曲霉] 2,000 E-TRNGL
β-Glucosidase(A.niger) Beta葡[萄]糖苷酶[黑曲霉] 200 E-BGLUC
Recβ-Glucosidase(Agrobacterium sp.) Beta葡[萄]糖苷酶[农杆菌] 600 E-BGISAG
Recβ-Glucosidase(thermostable)(T.maritima) Beta葡[萄]糖苷酶[耐热][热海栖热孢菌] 230 E-BGOSTM
Glutamate dehydrogenase(E.coli) 谷氨酸脱氢酶[大肠杆菌] 10,000 E-GLDHEC
RecGlutamate Oxaloccetate Transaminase(E.coli) 谷氨酸草酰乙酸转氨酶[大肠杆菌] 5,000 E-GOTEC
Glutamate pyruvate transminase(B.subtilils) 谷氨酸丙酮酸转氨酶[枯草杆菌] 2,500 E-GPTBS
Glucose Oxidase/catalase Mixture 葡萄糖氧化酶/催化酶混合物 2 vials E-GOXCA
Guanylate Kinase(prokayote) 鸟苷酸激酶[原核生物] 500 E-GMPK
3-Hydrxybutyrate dehydrogenase(prokaryote) 3-羟丁酸脱氢酶[原核生物] 200 E-HBDH
Hexokinase 已糖激酶 10,000 E-HEX10
Hexokinase 已糖激酶 50,000 E-HEX50
Hexokinase(420U/ml)+G6PDH(210U/ml) 已糖激酶[420U/ml]+葡萄糖-6-磷酸脱氢酶[210U/ml] 10ml E-HKGDH
RecHaluronate lyase(novel specificity)(soil prokaryote) 透明质酸[裂解]酶[新品][土壤原核生物] 50 E-HYLSP
endo-Inulinase(A.niger) 菊粉内切酶[黑曲霉] 200 E-ENDOI
exo-Inulinase(A.niger) 菊粉外切酶[黑曲霉] 5000 E-EXOI
Invertase(Fructofuranosidase)(yeast) 蔗糖酶[呋喃果糖苷酶][酵母] 150000 E-INVRT
Isoamylase(Glycogen 6-glucanohydrolase) 异淀粉酶[糖原6-葡萄糖苷酶] 500 E-ISMY
Isocitrate dehydrogenase (B.subtilis) 异柠檬酸脱氢酶[枯草杆菌] 2000 E-ICDHBS
Lichenase(endo-1,3(4)-D-Glucanase)(Bacillussp.) 地衣聚糖酶[1,3(4)-D-葡聚糖内切酶[芽孢杆菌] 5000 E-LICHN
RecD-Malate dehydrogenase(E.coli) D-苹果酸脱氢酶[大肠杆菌] 200 E-DMDHEC
RecL-Malate dehydrogenase(E.coli) L-苹果酸脱氢酶[大肠杆菌] 50000 E-LMDHEC
endo-1,4-β-Mannanase(A.niger)) 1,4-β甘露聚糖内切酶[黑曲霉] 500 E-BMANN
endo-1,4-β-Mannanase(Bacillus sp.) 1,4-β甘露聚糖内切酶[芽孢杆菌] 2000 E-BMABS
RecMannitol dehydrogenase(P.fluorescens) 甘露醇脱氢酶[荧光假单胞菌] 500 E-MNHPF
Rec-β-Mannosidase(C.fimi) β甘露糖苷酶[纤维单胞菌] 200 E-BMOSCF
Pectte Lyase M1(Aspergillus sp.) 果胶酸裂合酶M1[曲霉属] 600 E-PECLY
RecPectate Lyase M2(C.japonicus) 果胶酸裂合酶M2[日本龟蜡蚧] 2500 E-PLYCJ
RecPhosphoglucose Isomerse (B.subtillis) 磷酸葡糖异构酶[枯草杆菌] 5000 E-PGIBS
RecPhosphoglucose Isomerse (B.subtillis) 磷酸葡糖异构酶[枯草杆菌] 50000 E-PGIBSB
RecPhosphoglucose Isomerse (E.coli) 磷酸葡糖异构酶[大肠杆菌] 10000 E-PGIEC
RecPhosphoglucose Isomerse (E.coli) 磷酸葡糖异构酶[大肠杆菌] 50000 E-PGIECB
6-Phosphogluconate dehydrogenase(E.coli) 6-磷酸葡糖酸脱氢酶[大肠杆菌] 150 E-PGDHEC
RecPhosphoglucose Isomerse (S.cerevisiae) 磷酸葡糖异构酶[酿酒酵母] 5000 E-PGISC
RecPhosphoglucose Isomerse (S.cerevisiae) 磷酸葡糖异构酶[酿酒酵母] 50000 E-PGISCB
RecPhosphoglucose Isomerse (E.coli) 磷酸甘露糖异构酶[大肠杆菌] 1000 E-PMIEC
endo-Polygalacturonanase M1(A.niger) 聚半乳糖醛酸M1[黑曲霉] 5000 E-PGALS
endo-Polygalacturonanase M2(A.niger) 聚半乳糖醛酸M2[黑曲霉] 10000 E-PGALUSP
Protease(Subtillisin A)(B.licheniformis) 蛋白酶[枯草杆菌][对地衣芽孢杆菌] 2 g(40ml) E-BSPRT
Pullulanase M1(K.planticola) 普鲁兰酶M1[植生克雷伯氏菌] 2000 E-PULKP
Pullulanase M2(B.licheniformis) 普鲁兰酶M2[对地衣芽孢杆菌] 2000 E-PULBL
Pullulanase M3(B.acidopullulyticus) 普鲁兰酶M3[嗜酸普鲁兰芽孢杆菌] 5000 E-PULBA
Succinyl-CoA synthetase(prokaryote) 琥珀酰辅酶A合成酶[原核生物] 550 E-SCOAAS
Sucrase (Maltase)(yeast) 蔗糖酶[麦芽糖酶][酵母] 220 E-SUCR
Thymidylate Kinase (prokaryote) 胸苷酸激酶[原核生物] 150 E-TMPK
Xylanase M1(T.viride) 木聚糖酶M1[绿色木霉菌] 8000 E-XYTR1
Xylanase M2(T.longibrachiatum;pl 5.5) 木聚糖酶M2[长枝木霉] 4000 E-XYTR2
Xylanase M3(T.longibrachiatum;pl 9.0) 木聚糖酶M3[长枝木霉] 8000 E-XYTR3
Xylanase M4(A.niger) 木聚糖酶M4[黑曲霉] 8000 E-XYTR4
Xylanase M6(rumen microorganism) 木聚糖酶M6[瘤胃微生物] 8000 E-XYRU6
Alkaline phosphatase(E.coli) 碱性磷酸酶(大肠杆菌) 400 E-ALPEC
Glutaminase(E.coli) 谷氨酰胺酶(大肠杆菌) 2500 E-GLUTEC
Guanylate Kinase(prokayote) 鸟[嘌呤核]苷酸激酶(原核生物) 500 E-GMPK
3-Hydrxybutyrate dehydrogenase(prokaryote) 3-羟基苯甲酸酯脱氢酶(原核生物) 200 E-HBDH
myo-Inositol dehydrogenase(B.subtillis) 肌环己六氢醇脱氢酶(枯草芽孢杆菌) 500 E-INDH
D-Lactate dehydrogenase(L.mesenteroides) D-乳酸盐脱氢酶(肠膜明串珠菌) 15000 E-DLDHLM
β-Mannanase(T.maritima) Beta甘露聚糖酶(海栖热袍菌) 250 E-BMATM
Malt Amylase Standard 麦芽淀粉酶标准液 100ml E-MAST

 

淀粉损失检测试剂盒

淀粉损失检测试剂盒,Starch Damage Assay Kit

英文名:Starch Damage Assay Kit

中文品名:淀粉损伤检测试剂盒

货号:K-SDAM

规格:200 assays per kit,200 次检测

应用:淀粉损伤检测试剂盒,用于谷物面粉中淀粉损伤的检测和分析。

原理:
谷物淀粉中淀粉损伤紫外检测方法
淀粉损伤检测试剂盒 (K-SDAM)检测原理
检测方法:分光光度法 @510 nm
反应时间:~ 40分钟
检测限:样品重量的0.5-100%
应用案例:
谷物面粉和其它食材。
方法识别:
符合AACC (方法 76-31.01), ICC (标准号 164) 和 RACI (标准方法)。
试剂盒组成:
Bottle 1: 真菌α-淀粉酶(pH5.4和40°C条件下,10 mL, 1,000 U/mL on Ceralpha reagent* )。硫酸铵悬浮液。
4°C下稳定超过 3年
Bottle 2: 淀粉葡萄糖苷酶(pH 4.5 和40°C条件下,4 mL, 200 U/mL 在可溶性淀粉中)。硫酸铵悬浮液。
4°C稳定超过3年
Bottle 3: GOPOD 试剂缓冲液。缓冲液(50 mL, pH7.4), 对羟基苯甲酸和叠氮钠(0.095% w/v).
4°C稳定超过4年
Bottle 4: GOPOD 试剂酶。葡萄糖氧化酶,过氧化酶和4-氨基安替比林。冻干粉。
-20°C稳定超过5年
Bottle 5: D-葡萄糖标准溶液(5 mL, 1.5 mg/mL) 溶于0.2% (w/v)苯甲酸。
室温下稳定超过5年
Bottle 6: 小麦面粉标样。淀粉损伤程度在小瓶标签上注明。
室温下稳定超过5年

Megazyme 淀粉损伤检测试剂盒(K-SDAM)

淀粉损伤检测试剂盒, Starch Damage Assay Kit , 货号:K-SDAM
品牌:Megazyme
货号:K-SDAM
中文品名:淀粉损伤检测试剂盒
品名:Starch Damage Assay Kit
规格:200 次检测
应用:淀粉损伤检测试剂盒,用于谷物面粉中淀粉损伤的检测和分析。
原理:
谷物淀粉中淀粉损伤紫外检测方法
淀粉损伤检测试剂盒 (K-SDAM)检测原理
检测方法:分光光度法 @510 nm
反应时间:~ 40分钟
检测限:样品重量的0.5-100%
应用案例:
谷物面粉和其它食材。
方法识别:
符合AACC (方法 76-31.01), ICC (标准号 164) 和 RACI (标准方法)。
试剂盒组成:
Bottle 1: 真菌α-淀粉酶(pH5.4和40°C条件下,10 mL, 1,000 U/mL on Ceralpha reagent* )。硫酸铵悬浮液。
4°C下稳定超过 3年
Bottle 2: 淀粉葡萄糖苷酶(pH 4.5 和40°C条件下,4 mL, 200 U/mL 在可溶性淀粉中)。硫酸铵悬浮液。
4°C稳定超过3年
Bottle 3: GOPOD 试剂缓冲液。缓冲液(50 mL, pH7.4), 对羟基苯甲酸和叠氮钠(0.095% w/v).
4°C稳定超过4年
Bottle 4: GOPOD 试剂酶。葡萄糖氧化酶,过氧化酶和4-氨基安替比林。冻干粉。
-20°C稳定超过5年
Bottle 5: D-葡萄糖标准溶液(5 mL, 1.5 mg/mL) 溶于0.2% (w/v)苯甲酸。
室温下稳定超过5年
Bottle 6: 小麦面粉标样。淀粉损伤程度在小瓶标签上注明。
室温下稳定超过5年

优点:

价格非常具有竞争力
所有试剂制备后可以稳定保存超过2年
仅提供酶法检测试剂盒
特异性
操作简单
官网提供Mega-Calc™ 软件工具用于一站式原始数据处理
包含标准品

The Starch Damage test kit is suitable for the measurement and analysis of starch damage in cereal flours.

Colourimetric method for the determination of Starch Damage
in cereal flours

Principle:
(fungal α-amylase)
(1) Damaged (or gelatinised) starch + H2O → maltodextrins

(amyloglucosidase)
(2) Maltodextrins + H2O → D-glucose

(glucose oxidase)
(3) D-Glucose + H2O + O2 → D-gluconate + H2O2

(peroxidase)
(4) 2H2O2 + p-hydroxybenzoic acid + 4-aminoantipyrine →
quinoneimine + 4H2O

Kit size: 200 assays
Method: Spectrophotometric at 510 nm
Total assay time: ~ 40 min
Detection limit: 0.5-100% of sample weight
Application examples:
Cereal flours and other materials
Method recognition:
AACC (Method 76-31.01), ICC (Standard No. 164), and RACI (Standard
Method)

Advantages

  • Very cost effective
  • All reagents stable for > 2 years after preparation
  • Only enzymatic kit available
  • Very specific
  • Simple format
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included
参考文献:
An improved enzymic method for the measurement of starch damage in wheat flour. Gibson, T. S., Al Qalla, H. & McCleary, B. V. (1992). Journal of Cereal Science, 15(1), 15-27.
Collaborative evaluation of an enzymatic starch damage assay kit and comparison with other methods. Gibson, T. S., Kaldor, C. J. & McCleary, B. V. (1993). Cereal Chem., 70(1), 47-51.
Measurement of total starch in cereal products by amyloglucosidase-alpha-amylase method: collaborative study. McCleary, B. V., Gibson, T. S. & Mugford, D. C. (1997). Journal of AOAC International, 80, 571-579.
Measurement of carbohydrates in grain, feed and food. McCleary, B. V., Charnock, S. J., Rossiter, P. C., O’Shea, M. F., Power, A. M. & Lloyd, R. M. (2006). Journal of the Science of Food and Agriculture, 86(11), 1648-1661.
Starch properties, in vitro digestibility and sensory evaluation of fresh egg pasta produced from oat, teff and wheat flour. Hager, A. S., Czerny, M., Bez, J., Zannini, E. & Arendt, E. K. (2013). Journal of Cereal Science, 58(1), 156-163.
Effect of sorghum flour composition and particle size on quality properties of gluten-free bread. Trappey, E. F., Khouryieh, H., Aramouni, F. & Herald, T. (2014). Food Science and Technology International, 1082013214523632.
Nutritional properties and ultra-structure of commercial gluten free flours from different botanical sources compared to wheat flours. Hager, A. S., Wolter, A., Jacob, F., Zannini, E. & Arendt, E. K. (2012). Journal of Cereal Science, 56(2), 239-247.
Quality variations in flours used for pretzel manufacturing. Yao, N. & Seetharaman, K. (2010). International Journal of Food Science & Technology, 45(10), 2052-2061.
Effect of corn preparation methods on dry-grind ethanol production by granular starch hydrolysis and partitioning of spent beer solids. Lamsal, B. P., Wang, H. & Johnson, L. A. (2011). Bioresource Technology, 102(12), 6680-6686.
Flaking as a corn preparation technique for dry-grind ethanol production using raw starch hydrolysis. Lamsal, B. P. & Johnson, L. A. (2012). Journal of Cereal Science, 56(2), 253-259.
Chemical composition and functional properties of native chestnut starch (Castanea sativa Mill). Cruz, B. R., Abraão, A. S., Lemos, A. M. & Nunes, F. M. (2013). Carbohydrate Polymers, 94(1), 594-602.
Changes in rice with variable temperature parboiling: thermal and spectroscopic assessment. Himmelsbach, D. S., Manful, J. T. & Coker, R. D. (2008). Cereal chemistry, 85(3), 384-390.
Determination of formulation and processing factors affecting slowly digestible starch, protein digestibility and antioxidant capacity of extruded sorghum–maize composite flour. Licata, R., Chu, J., Wang, S., Coorey, R., James, A., Zhao, Y. & Johnson, S. (2014). International Journal of Food Science & Technology, 49(5), 1408-1419.
Analysis of starch amylolysis using plots for first-order kinetics. Butterworth, P. J., Warren, F. J., Grassby, T., Patel, H. & Ellis, P. R. (2012). Carbohydrate Polymers, 87(3), 2189-2197.

淀粉总量检测试剂盒

淀粉总量检测试剂盒 Total Starch (AA/AMG) Assay Kit

品牌:Megazyme

产品货号:K-TSTA

品牌:Megazyme

产品品名:淀粉总量检测试剂盒

英文品名:Total Starch (AA/AMG) Assay Kit

规格型号:100 assays per kit

商品说明:

淀粉总量检测试剂盒 Total Starch (AA/AMG) Assay Kit  使用说明:

简介:
     酸水解法和酶法被广泛的应用于淀粉含量测定,酸水解法仅仅适用于纯净的淀粉样品,应用范围有限。酶法的前处理步骤上有各种变化,经过凝胶、液化和糊精化作用,糊精水解生成葡萄糖,最终以测量的葡萄糖计算淀粉含量。AACC方法76-11特殊之处在于:在高压蒸汽和碱性环境下淀粉糊化成为凝胶,然后再用淀粉葡糖苷酶将淀粉转化为葡萄糖进行测量。AACC方法76-11会低估某些样品的淀粉含量,包括高多糖玉米淀粉和众多的经过加工的谷物产品。今天应用的众多的测定方法都使用了联合处理方法,如在样品处理过程中或直接在淀粉凝胶化后使用耐热α-淀粉酶。对于难凝胶的样品(如高多糖玉米淀粉)使用了氢氧化钠或二甲基亚砜作为溶剂。为确保膳食纤维中的淀粉能够全部溶解,Englyst和Cummings(1988)总结的处理方法中使用了去分支酶,支链淀粉酶。
    为了测量极端样品得到满意结果,兼顾数量和可靠性,Megazyme提供了一个总淀粉分析试剂盒,基于使用耐热性淀粉酶和淀粉葡糖苷酶。这一方法已被AOAC和AACC采用 (Method 76.13)。
    最近,耐热淀粉酶可在低pH环境下使用。因此,我们更新了我们的总淀粉测量方法加入了这种酶。这一改进的最大益处在于可以在同一pH(pH5.0)条件下进行耐热性淀粉酶和淀粉葡糖苷酶孵育,简化步骤以及减少麦芽酮糖(抗耐热性淀粉酶和淀粉葡糖苷酶水解)的产生。另一改进是使用己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶/ NADP+在D-葡萄糖处理步骤(K-TSHK5)。Megazyme总淀粉分析方法可以测量广泛范围内食品,饲料,植物和谷类产品(自然的或加工的)。对于大多数样品(例如小麦面粉),淀粉可以在100°C抗耐热性淀粉酶处理步骤中完全可溶。包含高水平抗性淀粉(例如高多糖含量玉米淀粉)样品,需要先用冷2 M KOH 或 热DMSO进行预溶解。含可溶性淀粉和糊精的样品,无需进行抗耐热性淀粉酶处理。
原理:
     抗耐热性淀粉酶水解淀粉为可溶性分支麦芽糊精和去分支麦芽糊精。
样品中的抗性淀粉可用2M KOH进行预溶解,再用醋酸钠缓冲液进行中和再进行淀粉酶水解。或者用DMSO在100°C进行溶解。
淀粉葡萄糖苷酶水解麦芽糊精至D-葡萄糖。
D-葡萄糖氧化为D-葡萄糖酸脂,释放出(H2O2),再用过氧化氢酶催化进行显色反应,产生醌亚胺染料。
样品包含高水平的D-葡萄糖和麦芽糊精可以在分析前用80%乙醇进行洗涤。单个样品可在70分钟内完成测定。20个样品可在2小时内完成。
特异性,灵敏度,线性范围和精确性
此试剂盒专用于分析a-葡聚糖(包括淀粉,糖原,植物糖原和非抗性麦芽糊精)。
最小可区分的吸收值是0.01吸收值范围。这对应于1.0mg的D-葡萄糖(或0.9mg淀粉)/L在最大样品体积1ml。检测极限:2.0mgD-葡萄糖(或1.8mg淀粉)/L,这对应于0.02吸光度区别在最大体积1ml中。
此试剂盒在5-100ugD-葡萄糖范围内呈线性。一个样品溶液的重复测定中,吸收值会有0.005至0.010的波动。当样品体积为1ml时,这相当于0.05-1ml/L浓度的D-葡萄糖。如果样品在准备过程中被稀释,结果需要乘以稀释倍数。例如在样品准备时,样品称重,如10g/L,变异范围将在0.02至0.05g/100g。
干扰:
如果D-葡萄糖的转化在5分钟内完成,不会产生干扰。可以通过加入D-葡萄糖至反应完成后试管内(例如50ug在0.1ml)以检测干扰。可以看到吸光度显著上升。
样品内的干扰物质可以通过加入内标进行分析。可以对这标准进行定量校正。样品操作中的损失可以通过在起始步骤中加入D-葡萄糖进行校正。
试剂盒成分
Megazyme总淀粉含量测定试剂盒提供有足够运行100次试验的试剂,并提供有全部的试验方法:
瓶1: 耐热α-淀粉酶(10mL, 3,000U/mL在CERALPHA试剂中pH6.5; 40°C 或1600U/mL在CERALPHA试剂中pH5.0; 40°C)。稳定性>4年, 4°C保存。
瓶2: 淀粉葡糖苷酶(10mL, 3300U/mL在可溶性淀粉)(或200U/mL在p-nitrophenylβ-maltoside*,pH4.5,40°C)稳定性>4年, 4°C保存。
完整的分析程序可咨询客服。
瓶3: GOPOD试剂缓冲液。磷酸钾缓冲液(0.26M,pH7.4),对羟基苯甲酸(0.22M),叠氮化钠(0.4%W/V)稳定性>4年, 4°C保存。
 注意:
1. 如果GOPOD缓冲液存储在-20°C,会形成盐结晶,用双蒸水稀释至1L前必须完成溶解。
2. 此溶液含叠氮化钠(0.4%W/V),有毒。
瓶4: GOPOD试剂酶。葡萄糖氧化酶(> 12,000 U) 和过氧化物酶(> 650 U)和4-氨基安替比林(80mg)。冻干粉,稳定性>4年, -20°C保存。
瓶5: 葡萄糖标准溶液(5ml,1mg/mL)在0.2% W/V苯甲酸溶液中。稳定性>4年,室温保存。
瓶6: 标准的玉米淀粉。淀粉含量见标签。稳定性>4年, -20°C保存。
准备试剂溶液
溶液1  用试剂1(100mM醋酸钠缓冲液, pH5.0,自备)稀释1.0mL瓶1成分至30mL 。分成小份后冻存。稳定性>3年, -20°C保存。
注意:如果按照AOAC方法996.11(example b),用试剂4(50mM MOPS缓冲液,pH7.0)稀释酶。
溶液2  此酶不用稀释可以直接使用,由于酶溶液具有一定粘稠度,所以必须使用正确的移液器。4°C下保存,稳定性>3年。
溶液3  用蒸馏水稀释瓶3成分(GOPOD试剂缓冲液)到1L, 立即使用。
溶液4 用20ml溶液3溶解瓶4成分再倒回溶液3瓶子。铝箔纸包裹避光。这就是          葡萄糖测定试剂(GOPOD试剂) 稳定性: 4°C下保存,3个月;-20°C下保存,              12个月;
        分装成小份再进行冻存,只能冻融一次。
        新鲜配制的试剂呈浅黄色或浅紫色。4°C下保存2-3个月过程中,逐渐变成深紫色。用水为空白对照时,此溶液的吸光度<0.05。
溶液5&6 同瓶5&6
自备试剂
1.醋酸钠缓冲液(100mM, pH5.0) +氯化钙(5mM) 
     5.8ml冰醋酸(1.05g/mL)加入900mL蒸馏水,用1M(4g/100mL)NaOH调节pH到5.0,大约需要30mL。4°C下保存2个月.
     添加0.74g二水氯化钙完全溶解, 定容到1L,  4°C下保存>6个月。
注意:可通过添加叠氮化钠(0.2g/L)增加此缓冲液的稳定性。室温2年。必须在pH调完后再加入叠氮化钠。酸化的叠氮化钠会释放出有毒气体。
2.醋酸钠缓冲液(1.2M, pH3.8) 
     69.6ml冰醋酸(1.05g/mL)加入800mL蒸馏水, 用4M NaOH调节pH到3.8, 定容到1L。室温下保存12个月。
3.氢氧化钾溶液(2M)
加入112.2 g KOH 至900 mL 去离子水,搅拌溶解,定容一升。储存于密闭容器。室温下>2年。
4. MOPS缓冲液(50mM,pH7.0)+氯化钙(5mM) +叠氮化钠(0.02%)(仅用于example b分析样品)
    11.55g MOPS(钠盐, Sigma cat. M-9381)加入900mL蒸馏水, 用1M(10%V/V)HCl调节pH到7.0,大约需要17mL。 添加二水氯化钙(0.74g)和叠氮化钠(0.2g), 完全溶解, 然后调整到1L, 4°C下保存6个月。
5. 醋酸钠缓冲液(200mM,pH4.5)+叠氮化钠(0.02%)(仅用于example b分析样品)
冰醋酸(11.8mL,1.05g/mL)加入900mL蒸馏水, 用1M(4g/100mL)NaOH调节pH到4.5,大约需要60mL。加入叠氮化钠(0.2g),完全溶解,然后调整到1L, 4°C下保存6个月。
注意:可通过添加叠氮化钠(0.2g/L)增加此缓冲液的稳定性。室温2年。必须在pH调完后再加入叠氮化钠。酸化的叠氮化钠会释放出有毒气体。
设备:
              1.玻璃试管(圆底;16x120mm或18x150mm)
              2.离心机(3,000rpm)
              3.微量移液器(100uL).
              4.连续分配器
              5.分析天平.
              6.分光光度计510nm.
              7.漩涡混合器
              8.定时钟
              9.沸水浴锅和试管夹
注意事项:
1.GOPOD试剂的孵育时间没有严格规定,但是至少要20分钟,并在60分钟内测定吸光度.
2.每次试验必须设定试剂空白对照和葡萄糖对照(100μg, 四倍)。
    a)试剂空白对照: 0.1mL蒸馏水+3.0mLGOPOD溶液
    b)葡萄糖对照包括:0.1mL葡萄糖标准溶液(100μg/0.1mL)+3.0mLGOPOD溶液。因子F(页码13和14)通过D-葡萄糖在标准分析中读得的吸光度进行计算(例如100/1.038=96.386)。
3.每次试验必须设定标准面粉或淀粉样品
4.每一新批此的GOPOD溶液,必须验证其与100μg葡萄糖标准反应产生颜色所需要的最长时间, 通常为15分钟左右。
样品空白:
    样品空白按照标准试验程序(example A)进行,将第4步修正为添加3mL蒸馏水,第5步中也用蒸馏水替代其中的淀粉葡糖苷酶.也可以用样品前处理中所用的酒精作为样品空白( example E)。
样品准备示例
A.不含抗性淀粉,D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物(建议的程序,pH5.0孵育)。
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入0.2mL乙醇溶液(80%v/v)湿润样品帮助分散, 用漩涡混合器混合。
4.立即加入3mL耐热α-淀粉酶(100mM醋酸钠稀释), 在沸水浴中孵育6分钟(在孵育2分钟,4分钟,6分钟的时强烈振荡试管).
    注意:在这一步中强力震荡是关键,目的是确保浆状样品能完全的混匀(去除块状)。同样,每间隔2分钟振荡也是为了防止由于酒精蒸发导致某些样品被喷出试管。如果使用聚丙烯管,增加孵育时间至12分钟,在 4, 8和12强烈震荡。
5.将试管放置于50°C的水浴锅中, 加入0.1mL瓶2成分(淀粉葡糖苷酶,330U在淀粉上)。充分混合,在50°C下孵育30分钟。
6.将全部的溶液转移到100mL的容量瓶中,用洗瓶冲洗试管,并也倒入容量瓶中,然后用蒸馏水调整溶液体积, 充分混匀。取部分溶液离心(3,000rpm,10分钟)。取清澈的未稀释的上清用于分析。
     注意:对于含有1-10%淀粉的样品,在第6步中用蒸馏水调整溶液至10mL,充分混匀,离心(3,000rpm,10分钟),该溶液可以直接进行第7步.对于含10-100%淀粉的样品,用蒸馏水稀释1.0mL样品液到10mL再进行第7步。
7.转移两份稀释的样品溶液(0.1mL)到园底试管中(16x100mm)。
8.加入3.0mLGOPOD溶液到每一个试管中(包括葡萄糖对照和试剂空白对照), 然后在50°C下孵育20分钟
9.葡萄糖对照包括0.1mL葡萄糖标准溶液(1mg/mL)+3.0mLGOPOD溶液。              试剂空白对照: 0.1mL蒸馏水+3.0mLGOPOD溶液
10.相对于试剂空白在510nm下测定每一个样品和葡萄糖质控的吸光度。
B.不含抗性淀粉,D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物(AOAC 996.11)。
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入0.2mL乙醇溶液(80%v/v),用漩涡混合器混合。
4.立即加入3mL耐热α-淀粉酶(50mM MOPS稀释), 在沸水浴中孵育6分钟(在孵育2分钟,4分钟,6分钟的时强烈振荡试管).
    注意:在这一步中强力震荡是关键,目的是确保浆状样品能完全的混匀(去除块状)。同样,每间隔2分钟振荡也是为了防止由于酒精蒸发导致某些样品被喷出试管。如果使用聚丙烯管,增加孵育时间至12分钟,在 4, 8和12强烈震荡。
5.将试管放置于50°C的水浴锅中, 加入醋酸钠缓冲液(4ml,200mM,pH4.5),加入0.1mL瓶2成分(淀粉葡糖苷酶, 20U)。充分混合,在50°C下孵育30分钟。
6. 按照example A 步骤6继续实验。
C.含抗性淀粉,不含D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物(建议KOH溶解)
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入0.2mL乙醇溶液(80%v/v),用漩涡混合器混合。
4.放入搅拌架子,加入2ml 2M KOH至每个试管中,冰水混合浴中搅拌20分钟左右,重悬粉末和溶解抗性淀粉。
注意:
1.不要使用涡旋仪混匀,会使淀粉乳化。
2.确保加入KOH时,试管处于剧烈震荡状态。这是为了避免淀粉形成团块难以溶解。
5.当试管在磁力搅拌器上搅拌时,加入8ml 1.2M醋酸钠缓冲液(pH3.8)至每个试管。立即加入0.1ml耐热α-淀粉酶(瓶1)和0.1mL淀粉葡糖苷酶(瓶2),充分混合,在50°C下孵育
6. 孵育30分钟,间断混匀。
7. 样品淀粉含量>10%:将全部的溶液转移到100mL的容量瓶中,用洗瓶冲洗试管,并也倒入容量瓶中,然后用蒸馏水调整溶液体积至100ml, 充分混匀。取部分溶液离心(1800g,10分钟)。
8. 样品淀粉含量<10%:直接离心(1800g,10分钟)。总体积约10.4ml(此体积可能有一定波动,特别是湿样品用于分析时,估计体积用于计算)。
9. 按照example A 步骤7继续实验。
D.含抗性淀粉,不含D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物(AOAC 996.11 DMSO溶解)
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入0.2mL乙醇溶液(80%v/v),用漩涡混合器混合。
4.立即加入2ml DMSO,涡旋混匀。沸水浴5分钟。
5.按照example A 步骤4继续实验。
E.含D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入5mL乙醇溶液(80%v/v),80-85°C孵育5分钟。涡旋混匀,再加入5ml乙醇溶液(80%v/v)。
4.离心1800g(3000rpm)10分钟。去除上清。
5.10mL乙醇溶液(80%v/v)重悬沉淀。离心去除上清。
6. 按照example A 步骤4继续实验。
若样品含抗性淀粉,按照example C步骤4继续实验。
计算:
ΔA=相对于试剂空白所读取的吸光度
    FV=总体积(例如100ml或10ml)
0.1 =样品分析体积
1/1000=转化从ug至mg
100/w=淀粉作为干粉重量的比例。
W=干粉重量
162/180=D葡萄糖转化为脱氢葡萄糖
淀粉%(占干物质比重):=淀粉%X100/100-水分含量(%)

 

英文说明:

The Total Starch (AA/AMG) test kit is used for the measurement and analysis of total starch in cereal flours and food products. This kit now contains an improved α-amylase that allows the amylase incubations to be performed at pH 5.0 (as well as pH 7.0).

Colourimetric method for the determination of Total Starch in
cereal products, feeds, foodstuffs and other materials

Principle:
(α-amylase, 100°C ± DMSO)
(1) Starch granules + H2O → maltodextrins

(amyloglucosidase)
(2) Maltodextrins + H2O → D-glucose

(glucose oxidase)
(3) D-Glucose + H2O + O2 → D-gluconate + H2O2

(peroxidase)
(4) 2H2O2 + p-hydroxybenzoic acid + 4-aminoantipyrine →
quinoneimine + 4H2O

Kit size: 100 assays
Method: Spectrophotometric at 510 nm
Total assay time: ~ 90 min
Detection limit: 1-100% of sample weight
Application examples:
Cereal flours, food products and other materials
Method recognition:
AOAC (Method 996.11), AACC (Method 76-13.01), ICC (Standard Method
No. 168), and RACI (Standard Method)

Advantages

  • Very competitive price (cost per test)
  • All reagents stable for > 12 months after preparation
  • Simple format
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included

Beta葡聚糖[混联]检测试剂盒

β-葡聚糖[混联]检测试剂盒

产品货号:K-BGLU

产品品名:β-葡聚糖[混联]检测试剂盒

英文品名:β-Glucan (Mixed Linkage) Assay Kit

规格型号:100 assays per kit

β-葡聚糖是用独特的工艺开发的一种新的产品,其来源于新鲜的食品啤酒酵母。它是一种多糖,主要化学结构β-1,3 葡聚糖和β-1,6葡聚糖,其中前者具有抗肿瘤性质,而且能够极大地提高人体自然免疫力。

上海金畔生物科技有限公司提供β-葡聚糖[混联]检测试剂盒,比色法(510nm)测定谷物、饲料、食品、饮料和其他原料中的B-葡聚糖。

原理:

总检测时间:100min

检测限:样品重量的0.5-100%

适用样品:燕麦、大麦、麦芽、麦芽汁、啤酒、食品以及其他原料

优点:

成本低

提供的所有试剂稳定性>2年

只有酶试剂盒可用

特异性高

方法简单

包含标准品

方法认证:AOAC (Method 995. 16)、AACC (Method 32-23),EBC (Methods 3.11.1,8.16.l 和 8.11. 1)  ICC(标准号l66),and RACI(标准方法)

分析物意义: 大麦和燕麦的主要细胞壁多糖 

Megazyme检测试剂盒优点:反应迅速、试剂稳定, 只有酶检测试剂盒可用。 AOAC方法 995.16; AACC 方法 32-23

AACC Method 32-23.01, AOAC Method 995.16, EBC Methods 3.11.1, 4.16.1 and 8.11.1, ICC Standard No. 166 and RACI standard method for the measurement of 1,3:1,4-ß-D-glucan in cereal grains, milling fractions, wort and beer. Recommended/Standard procedure of the Association of Official Analytical Chemists (AOAC), American Association of Cereal Chemists (AACC), Royal Australian Chemical Institute (RACI), European Brewing Convention (EBC), and International Association for Cereal Science and Technology (ICC). Content:100 assays per kit

Colourimetric method for the determination of β-Glucan in
cereal grains, feed, foodstuffs, beverages and other materials

Principle:
(lichenase)
(1) β-Glucan + H2O → β-gluco-oligosaccharides

(β-glucosidase)
(2) β-Gluco-oligosaccharides + H2O → D-glucose

(glucose oxidase)
(3) D-Glucose + H2O + O2 → D-gluconate + H2O2

(peroxidase)
(4) 2H2O2 + p-hydroxybenzoic acid + 4-aminoantipyrine →
quinoneimine + 4H2O

Kit size: 100 assays
Method: Spectrophotometric at 510 nm
Total assay time: ~ 100 min
Detection limit: 0.5-100% of sample weight
Application examples:
Oats, barley, malt, wort, beer, food and other materials
Method recognition:
AOAC (Method 995.16), AACC (Method 32-23.01), EBC (Methods
3.10.1, 4.16.1 and 8.13.1), ICC (Standard No. 166), RACI (Standard
Method) and CODEX (Type II Method)

Advantages

  • Very cost effective
  • All reagents stable for > 2 years as supplied
  • Only enzymatic kit available
  • Very specific
  • Simple format
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included

REFERENCES:

  1. McCleary, B. V. and Glennie-Holmes, M. (1985). Enzymic quantification of (1-3)(1-4)-β-D-glucan in barley and malt. J. Inst. Brew. 91, 285-295.
  2. McCleary, B. V. and Nurthen, E. J. (1986). Measurement of (1-3)(1-4)-β-D-glucan in malt, wort and beer. J. Inst. Brew.92, 168-173.
  3. McCleary, B. V. and Codd, R. (1991). Measurement of (1-3) (1-4)-β-D-glucan in barley and oats: a streamlined enzymic procedure. J. Sci. Fd. Agric. 55, 303-312.
  4. McCleary, B. V. and Mugford, D. C. (1992). Interlaboratory evaluation of β-glucan analysis methods. In “The changing role of oats in human and animal nutrition”. Proceedings of the Fourth International Oat Conference, Adelaide, Australia. Oct 19-23.

Beta葡聚糖酶[麦芽和微生物]检测试剂盒

Beta葡聚糖酶[麦芽和微生物]检测试剂盒  β-Glucanase Assay Kit (Malt and Microbial)

1) 英文:Beta-Glucanase (Malt & Microbial) Assay Kit;

2) 中文:Beta葡聚糖酶[麦芽和微生物]检测试剂盒;

3) 规格: 100; 4) 货号:K-MBGL

商品说明:

β-Glucanase (Malt and Microbial) Assay Kit is suitable for the measurement and analysis of malt and bacterial β-glucanase and endo-1,4-β-glucanase.

Colourimetric method for the determination of β-Glucanase
in malt, foodstuffs and fermentation products

Principle:
(β-glucanase)
(1) Azo-Barley β-glucan (polymer) → Azo-barley β-glucan
(fragments)

(2) Add alcohol; centrifuge to remove polymeric Azo-barley
β-glucan

(3) Measure the absorbance of the supernatant solution

Kit size: 100 assays
Method: Spectrophotometric at 590 nm
Reaction time: ~ 30 min
Detection limit: 100 U/kg of malt
Application examples:
Malt extracts, wort, beer and other materials
Method recognition:
RACI (Standard Method)

Advantages

  • Very cost effective
  • All reagents stable for > 2 years during use
  • Only kit available
  • Very specific
  • Simple format
  • Standard included